微細空間へ運搬可能な抗体－薬物複合体の提案

最終年度は、開発した抗体改変技術を用いて、他研究機関と共同研究を行い、抗体の親和性向上を行った。抗体から、可変領域を同定し低分子抗体を設計した。設計した低分子抗体に対して、ランダム変異導入を行うことで、結合に関与している残基の決定を行い、決定したアミノ酸残基に対して飽和変異導入を行い、少量多品種培養することで網羅的に機能解析を行うことで置換候補有望アミノ酸を決定した。決定したアミノ酸のみが入るようなコドンライブラリーを設計し、ライブラリー規模を限定した同一出現頻度でのライブラリーを作製した。その結果、取得した抗体は10倍近く親和性向上していた。この結果から、本研究で開発した抗体改変技術は、ある程度の汎用性があることが示された。また、可変領域から設計される低分子抗体に対して、機能向上や新たな機能付与を目的とする場合、変異導入対象領域全体に網羅的にアラニンスキャンすることで、機能改変に寄与するアミノ酸残基を同定することは可能であるが、操作が煩雑になってしまい現実的ではない。そのため、本研究で開発した抗体改変技術は有用であると思われる。研究期間内で低分子抗体に薬剤を修飾することで微細空間を通過可能となるような知見を得ることができたので、今後低分子抗体に対して薬剤修飾を行うことで、治療範囲が広がるようなアプリケーションが多く利用可能となると思われる。今後は、薬剤修飾した低分子抗体の安定性を向上させることが課題として考えられる。

最終年度は、開発した抗体改変技術を用いて、他研究機関と共同研究を行い、抗体の親和性向上を行った。抗体から、可変領域を同定し低分子抗体を設計した。設計した低分子抗体に対して、ランダム変異導入を行うことで、結合に関与している残基の決定を行い、決定したアミノ酸残基に対して飽和変異導入を行い、少量多品種培養することで網羅的に機能解析を行うことで置換候補有望アミノ酸を決定した。決定したアミノ酸のみが入るようなコドンライブラリーを設計し、ライブラリー規模を限定した同一出現頻度でのライブラリーを作製した。その結果、取得した抗体は10倍近く親和性向上していた。この結果から、本研究で開発した抗体改変技術は、ある程度の汎用性があることが示された。また、可変領域から設計される低分子抗体に対して、機能向上や新たな機能付与を目的とする場合、変異導入対象領域全体に網羅的にアラニンスキャンすることで、機能改変に寄与するアミノ酸残基を同定することは可能であるが、操作が煩雑になってしまい現実的ではない。そのため、本研究で開発した抗体改変技術は有用であると思われる。研究期間内で低分子抗体に薬剤を修飾することで微細空間を通過可能となるような知見を得ることができたので、今後低分子抗体に対して薬剤修飾を行うことで、治療範囲が広がるようなアプリケーションが多く利用可能となると思われる。今後は、薬剤修飾した低分子抗体の安定性を向上させることが課題として考えられる。