ＪＡＫ２変異陽性白血病における新規治療標的に関する研究

JAK2突变阳性白血病新治疗靶点研究

• 批准号: 18J11847
• 负责人: 水野 秀明
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J11847/
• 关键词: 急性骨髄性白血病; JAK2V617F変異; 白血病幹細胞; JAK2; p53

申請者が所属する研究室ではp53ホモノックアウトマウスの造血幹細胞にV617F変異を有するJAK2遺伝子を導入して正常マウスに移植することでJAK2V617F変異陽性白血病マウスモデルを得られることを報告している。JAK2V617F変異陽性急性骨髄性白血病ではp53変異が協調して生じていることが10-20%と多く、JAK2V617Fがp53経路の変化に関与している可能性が示唆されたため、JAK2V617F陽性真性多血症患者の網羅的遺伝子発現の公開データであるGSE47018を用いて解析を行った。JAK2V617F陽性CD34陽性細胞では正常のCD34陽性細胞に比較してp53,MDM2,MDM4,CHK1/2といったp53およびp53の制御に関連する遺伝子発現量の変化は認められず、エンリッチメント解析でもp53経路の変化は認められなかったが、JAK-STAT経路およびAKT-mTOR経路の活性化が認められ、特にCyclin D1関連遺伝子のenrichmentが明らかになった。これらの結果からp53ノックアウトはJAK経路と相加的に細胞増殖に対して作用していると考えられ、p53経路阻害とJAK経路阻害の併用の重要性が示唆された。一方、AKT-mTOR経路の活性化ではオートファジー活性が低下することが知られているため、マウス造血幹細胞にレトロウイルスを用いてJAK2V617F変異遺伝子を導入してフラックスアッセイを行いオートファジー活性の変化を解析したが特に変化は認められず、AKT-mTOR経路と異なるオートファジー維持機構の存在が示唆された。これまでに、ヒト白血病細胞を用いたxenograft modelにおける解析として、凍結保存された白血病患者の骨髄白血病細胞をNSGマウスに移植を行った。一部のマウスで白血病発症が見られ、これらの白血病細胞をNSGマウスに再移植した2次移植を行ったが発症が見られなかった。今後網羅的遺伝子解析で同定された候補遺伝子に対する治療効果の確認には2次移植マウスモデルでの検証が有用であり、本実験系を確立し検証を行う予定である。

The applicant's laboratory reports on the introduction of JAK2 gene into normal hematopoietic stem cells and the transplantation of JAK2 V617F heteropositive leukemia cells. JAK2 V617F heteropositive acute osteoblastic leukemia p53 heteromorphic co-ordination between 10-20%, JAK2 V617F heteromorphic co-ordination between p53 and co-ordination between 10-20%, JAK2 V617F heteromorphic co-ordination between p53 and co-ordination between 10 - 20%, JAK2 V617F heteromorphic co-ordinated co-ordination between p53 and co-ordination between 10%, JAK2 V617F heteromorphic co-ordinated co-ordination between p53 and co JAK2 V617F-positive CD34-positive cells were compared with normal CD34-positive cells, and the changes in gene production were identified by p53, MDM2, MDM4, CHK1/2, p53, and p53 regulation. The changes in gene production were analyzed by p53 regulation, JAK-STAT regulation, AKT-mTOR regulation, and Cyclin D1 regulation. The results of this study indicate the importance of the combination of p53 and JAK pathway inhibition in cell proliferation. On the one hand, AKT-mTOR pathway activation is reduced in activity, and the use of JAK2 V617F in hematopoietic stem cells is reduced in activity. On the other hand, AKT-mTOR pathway activation is reduced in activity, and the existence of a maintenance mechanism is indicated. The leukemia cells were analyzed and frozen for transplantation using a xenograft model. A part of leukemia development was seen, and the leukemia cells were retransplanted twice. In the future, the analysis of the candidate genes will be determined, and the identification of the treatment results will be confirmed. The identification of the secondary transplant will be useful. The identification of the system will be determined.