オルガネラ間の接着制御による植物の代謝ダイナミクスの解明
通过控制细胞器之间的粘附来阐明植物代谢动力学
基本信息
- 批准号:18J13740
- 负责人:
- 金额:$ 0.96万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2018
- 资助国家:日本
- 起止时间:2018-04-25 至 2020-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
細胞小器官(オルガネラ)は、異種オルガネラと膜を介して相互作用し、協調して機能する。本研究では、任意のオルガネラを接着させる新技術の確立を目的として、不可逆的な反応として知られるBimolecular Fluorescence Complementarion(BiFC)反応を利用したオルガネラ接着技術の基盤開発に取り組んだ。BiFC反応は、二分割した蛍光タンパク質の断片(BiFC断片)が元の立体構造を再構築する反応である。接着させたいオルガネラの外膜上でBiFC反応を誘導した場合、オルガネラの接着部位が蛍光によって可視化され離れなくなると予想された。そこで、オルガネラ接着に用いるタグペプチドを選定し、オルガネラ外膜上でBiFC反応を誘導する実験系を立ち上げた。また、オオカナダモやシロイヌナズナなどの植物を材料として、オルガネラ接着技術の検証を行った。当初の計画通り、オオカナダモ細胞を用いた一過的発現系を利用して、葉緑体とペルオキシソームの接着を試みた。末端を細胞質側に向けた状態で葉緑体外包膜とペルオキシソーム膜に局在するタグペプチドを選定し、オルガネラ表面にBiFC断片を局在させるためのコンストラクトを構築した。作成したコンストラクトをオオカナダモの細胞に導入した結果、BiFC反応の誘導によって通常観察されないオルガネラの凝集体が生じ、この凝集体から蛍光が観察された。この結果から、オルガネラ膜上に形成されたBiFC複合体がオルガネラ同士を接着させることが示唆された。
Cell small organs (small organs) are heterogeneous, mediating interactions and coordinating functions. This study aims to establish a new technology for the development of arbitrary Fluorescence bonding technology, and to develop a new technology for the development of irreversible fluorescence bonding technology. BiFC is divided into two parts: BiFC Then, in the case of BiFC reaction induced on the outer membrane of the ring, the light of the joint part of the ring is visualized. The BiFC reaction is induced on the outer membrane of the cell and the system is established. The plant materials and materials used for the preparation of the adhesive film were tested and analyzed. In the original plan, the development system of chloroplasts and chloroplasts was used in the first place. The end of the cytoplasm is in the middle of the state, the chloroplast envelope membrane is in the middle of the selection process, the chloroplast surface is in the middle of the BiFC fragment, and the chloroplast envelope membrane is in the middle of the construction process. The results of cell introduction and induction of BiFC reaction are usually observed in the formation of aggregates and the formation of light in the aggregates. As a result, BiFC complexes were formed on the surface of the membrane, and then the BiFC complexes were formed on the membrane.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Development of a technique to glue organelles.
开发粘合细胞器的技术。
- DOI:
- 发表时间:2019
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Yuta Fujii;Keiji Numata;Yutaka Kodama
- 通讯作者:Yutaka Kodama
A novel orange-colored bimolecular fluorescence complementation (BiFC) assay using monomeric Kusabira-Orange protein
- DOI:10.2144/btn-2017-0121
- 发表时间:2018-04-01
- 期刊:
- 影响因子:2.7
- 作者:Fujii, Yuta;Yoshimura, Ayaka;Kodama, Yutaka
- 通讯作者:Kodama, Yutaka
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