薬剤性肝障害の進展機序の解明；特に，起炎因子が免疫細胞の発現と機能に与える影響

阐明药物性肝损伤的发生机制，特别是炎症因子对免疫细胞表达和功能的影响；

• 批准号: 18J14823
• 负责人: 倉持 瑞樹
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Osaka Prefecture University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J14823/
• 关键词: 肝細胞傷害; HMGB1; 炎症性シグナル; 糖終末代謝物受容体（RAGE）; 自然免疫; ラット; Toll様受容体

炎症の起点として，傷害・壊死細胞から放出されるDamage-Associated Molecular Patterns（DAMPs）の関与が注目されている．代表的なものにHigh mobilitygroup boxes（HMGBs）があり，HMGB1はToll-like receptor 4（TLR4）や糖終末代謝物受容体（RAGE）を受容体とするとの報告がある．しかし，HMGB1の起炎因子としての役割については不明な点が多い．本研究では，薬剤誘発性肝細胞傷害におけるHMGB1と，炎症細胞の特徴について解析を行った．肝細胞傷害を起こす薬剤としてチオアセトアミドを選択し，チオアセトアミド単独投与群と，チオアセトアミド投与後にHMGB1中和抗体を投与した群の肝組織を用いて，病理組織学的評価，リアルタイムPCR法による炎症性サイトカインを解析した．病理組織学的に，チオアセトアミド投与後12時間から軽度の肝細胞壊死とマクロファージと好中球の浸潤がみられ，免疫組織化学での陽性細胞数はHMGB1中和群で有意に少なかった．さらに，投与後24時間で肝逸脱酵素値はHMGB1中和群で有意に低値を示した．リアルタイムPCR法では，炎症性サイトカイン（IL-6）とマクロファージ遊走因子（MCP-1）がHMGB1中和群で有意に低かった．さらに，蛍光免疫染色でTAA投与後6時間でHMGB1の核から細胞質への移行を認めた．ウエスタンブロット法でTLR4のシグナル分子やMAPキナーゼの発現量が両群で有意差が認められなかったことから，さらに上流の分子に注目したところ，RAGEの特異的分子であるDia-1の発現が中和抗体投与群で低下していた．以上の事から，化学物質による肝細胞の傷害に応じて放出されたHMGB1が，RAGEを介して炎症を進展させ，好中球の動員やマクロファージの活性化に関与していると考えられる．

The origin of inflammation, injury and death of cells, release of Damage-Associated Molecular Patterns (DAMPs) and attention. High mobility group boxes (HMGBs) are represented by HMGB1 Toll-like receptor 4 (TLR4) and Glucose End Metabolite Receptor (RAGE). HMGB1 is an inflammatory factor. In this study, HMGB1 and HMGB1 were analyzed for the characteristics of inflammatory cells. Liver cell injury initiation, treatment, selection, isolation, treatment, HMGB1 neutralizing antibody treatment, treatment of liver tissue, histopathological evaluation, and analysis of inflammatory factors by polymerase chain reaction. Histological examination showed that the number of positive cells in HMGB1 and HMGB1 was significantly lower than that in HMGB1. In the evening, the liver escape enzyme value was higher than that of HMGB1 and the group was lower than that of HMGB1 and HMGB1. Inflammatory Serotype (IL-6) and Migratory Factor (MCP-1) were detected by PCR. At 6 hours after TAA administration, HMGB1 was identified by light immunostaining. TLR4 is a molecule that produces a neutralizing antibody, and the amount of TLR4 is a molecule that produces a neutralizing antibody. The above events are related to the release of HMGB1, RAGE, and inflammation in liver cells.

项目成果

ラット肝マクロファージとチオアセトアミド誘発ラット肝障害に対するデキサメサゾンの影響

地塞米松对大鼠肝脏巨噬细胞的影响及硫代乙酰胺所致大鼠肝损伤

• 发表时间: 2018
• 作者: Miyabe Y;Mukumoto N;Ono T;Iramina H;Hirashima H;Nakamura M.;倉持瑞樹
• 通讯作者: 倉持瑞樹

チオアセトアミド誘発ラット急性肝障害モデルでの好中球・マクロファージ誘導における炎症誘導因子(DAMPs)の役割の解析

硫代乙酰胺诱导的大鼠急性肝损伤模型中炎症诱导因子（DAMP）在中性粒细胞/巨噬细胞诱导中的作用分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 松本勇輝;山本隆文;高津浩;陰山洋;中野晃佑;本郷健太;前園涼;倉持瑞樹，井澤武史，ラマン・ナヒド，桑村充，山手丈至
• 通讯作者: 倉持瑞樹，井澤武史，ラマン・ナヒド，桑村充，山手丈至

薬剤誘発ラット肝障害モデルにおけるHigh-mobility group box1の炎症誘導因子としての役割の解析

高迁移率族box1作为炎症诱导因子在药物性大鼠肝损伤模型中的作用分析

• 发表时间: 2018
• 作者: Kawamura M;Yoshimura M;Nakamura M;Ishihara Y;Mukumoto N;Hirashima H;Iramina H;Hiraoka M;Mizowaki T.;倉持瑞樹，井澤武史，ムンムン・ペルビン，カリム・ムハンマド・ラビウル，桑村充，山手丈至
• 通讯作者: 倉持瑞樹，井澤武史，ムンムン・ペルビン，カリム・ムハンマド・ラビウル，桑村充，山手丈至