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Ｔｒａｎｓｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ選択的ＰＰＡＲγリガンドの創製と構造生物学的解析

反式抑制选择性 PPARγ 配体的创建和结构生物学分析

基本信息

批准号：
18J15022
负责人：
豊田洋介
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

HMG-CoA還元酵素（HMGR）は、コレステロール生合成経路における律速酵素であり、転写レベルと翻訳後レベルでのフィードバック制御を受ける。既知の合成低分子化合物であるSR12813は、HMGRの分解を介してコレステロール低下作用を示すことが報告されている。しかしながらその直接的なターゲット分子やメカニズムは明らかになっていなかった。そこで、SR12813が直接HMGRに結合することでHMGRの分解を誘導しているという仮説を立て、その検証のためにHMGRに対する光親和性標識プローブの創製を目指した。SR12813をリード化合物として、HMGR分解活性を指標とした構造活性相関を取得し、光親和性標識プローブ化に必要な官能基の導入部位を検討した。HMGR分解活性はHMGRの触媒ドメインをluciferaseで置き換えた融合タンパク質をHEK293に安定発現させ、化合物処理による細胞中のHMGR量の変化を発光により定量することで評価した。構造展開の結果、SR12813と比較して10程度強いHMGR分解活性を有する誘導体OGK3042の創製に成功した。また、得られた構造活性相関を基に光親和性標識プローブsrpDHYの創製に成功した。このsrpDHYを用いてHMGRに対するラベリング実験を行った所、srpDHYによるUV依存的なラベリングが起こり、ラベリングに対してOGK3042の濃度依存的な競合が起こることが明らかとなった。この結果から、想定した通りSR12813類縁体のHMGR分解活性は、化合物がSR12813に直接結合して起こることが示唆された。

HMG-CoA类维生素（HMGR）制剂、维生素B12合成绍路肽类快速生长素制剂申请单、非处方药制剂申请单、非处方药制剂申请单。已知合成低分子化合物氢化物SR12813中，HMGR低分解介导的氢化物还原酶抑制剂下的作用表示氢化物还原酶抑制剂。しかしながらその直接的なターゲット分子やメカニズムは明らかになっていなかった。SR12813直接HMGR聚合酶抑制剂HMGR酶分解酶抑制剂标准品，非酶抑制剂HMGR酶消化酶抑制剂和性取向酶抑制剂。SR12813氢化物歧化酶复合物，HMGR分解活性指氢化物歧化酶生成活性相，光催化和性氢化物歧化酶必需的非官方能基氢氧化物进入部分氢化物歧化酶。HMGR分解活性试剂盒HMGR细胞接触荧光素酶荧光素酶装置荧光素酶融合试剂盒HEK293固定化荧光素酶，复合物降解酶定量中HMGR细胞接触荧光素酶申请定量。制造展威优果，SR12813比比优果10度氢化HMGR分解活性剂有氢化物还原体OGK3042氢化物还原成功。因此，得不到再生制造活性相硫基光催化剂和性硫基光催化剂srpDHY的再生催化剂成功转化。使用srpDHY引用标准HMGR引用标准保留行请求所、srpDHY引用UV依赖的引用标准提起请求、引用标准引用标准OGK3042引用度依赖的引用标准提起请求。因此，想确定是否通过申请SR12813氢化物HMGR分解活性剂，化合物试剂SR12813直接结合标准起反应，显示出良好的反应性。