インフルエンザウイルス粒子内に取り込まれる宿主因子のウイルス増殖における機能解析

インフルエンザウイルスは、宿主因子の機能を利用して増殖するため、ウイルス増殖に関わる宿主因子の解析はウイルスの増殖機構の理解を深める上で重要である。本研究では、インフルエンザウイルスの増殖に関わる宿主因子の中で、特にウイルス粒子に取り込まれる因子に着目し、ウイルス増殖過程におけるそれらの機能を明らかにすることを目的とした。先行研究においてインフルエンザウイルスのウイルスタンパク質と相互作用することが示唆された宿主因子、かつ、ウイルスの粒子内に取り込まれることが報告されている宿主因子の中から、解析の候補因子を選定した。相互作用するウイルスタンパク質の種類、宿主細胞における機能、粒子内の存在量、等を考慮して28因子を選定し、以下の手順で解析を行った。A549細胞(ヒト肺上皮細胞)にsiRNAを導入し、各宿主因子のノックダウン細胞を準備した。まず、各宿主因子をノックダウンした際の細胞生存率を継時的に測定した。また、siRNA導入細胞にインフルエンザウイルスを感染させ、感染48時間後のウイルス力価をネガティブコントロールsiRNA導入細胞と比較した。ノックダウン後も細胞生存率が十分に維持され、かつ、ノックダウンがウイルス力価の有意な低下をもたらすような因子を探索した。しかしながら、28因子の中で、ウイルス増殖特異的に重要であると思われる因子は見られなかった。これらの因子は、A549細胞でのウイルス増殖には必須ではない可能性がある。ウイルス粒子内には多くの宿主因子が取り込まれており、ウイルス粒子の形成や維持などに関わっている可能性が予想されたが、これらの因子がウイルス増殖において何らかの役割を担っているのかどうかは不明であった。本研究によって、粒子内に取り込まれる因子が、必ずしもウイルス増殖に重要な機能を果たしているわけではないということが明らかとなった。

インフルエンザウイルスは、宿主因子の機能を利用して増殖するため、ウイルス増殖に関わる宿主因子の解析はウイルスの増殖機構の理解を深める上で重要である。本研究では、インフルエンザウイルスの増殖に関わる宿主因子の中で、特にウイルス粒子に取り込まれる因子に着目し、ウイルス増殖過程におけるそれらの機能を明らかにすることを目的とした。先行研究においてインフルエンザウイルスのウイルスタンパク質と相互作用することが示唆された宿主因子、かつ、ウイルスの粒子内に取り込まれることが報告されている宿主因子の中から、解析の候補因子を選定した。相互作用するウイルスタンパク質の種類、宿主細胞における機能、粒子内の存在量、等を考慮して28因子を選定し、以下の手順で解析を行った。A549細胞(ヒト肺上皮細胞)にsiRNAを導入し、各宿主因子のノックダウン細胞を準備した。まず、各宿主因子をノックダウンした際の細胞生存率を継時的に測定した。また、siRNA導入細胞にインフルエンザウイルスを感染させ、感染48時間後のウイルス力価をネガティブコントロールsiRNA導入細胞と比較した。ノックダウン後も細胞生存率が十分に維持され、かつ、ノックダウンがウイルス力価の有意な低下をもたらすような因子を探索した。しかしながら、28因子の中で、ウイルス増殖特異的に重要であると思われる因子は見られなかった。これらの因子は、A549細胞でのウイルス増殖には必須ではない可能性がある。ウイルス粒子内には多くの宿主因子が取り込まれており、ウイルス粒子の形成や維持などに関わっている可能性が予想されたが、これらの因子がウイルス増殖において何らかの役割を担っているのかどうかは不明であった。本研究によって、粒子内に取り込まれる因子が、必ずしもウイルス増殖に重要な機能を果たしているわけではないということが明らかとなった。