インフルエンザウイルス粒子内に取り込まれる宿主因子のウイルス増殖における機能解析

病毒复制中流感病毒颗粒中宿主因子的功能分析

• 批准号: 18J21238
• 负责人: 古澤 夢梨
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18J21238/
• 关键词: インフルエンザウイルス; 宿主因子; ウイルス粒子

インフルエンザウイルスは、宿主因子の機能を利用して増殖するため、ウイルス増殖に関わる宿主因子の解析はウイルスの増殖機構の理解を深める上で重要である。本研究では、インフルエンザウイルスの増殖に関わる宿主因子の中で、特にウイルス粒子に取り込まれる因子に着目し、ウイルス増殖過程におけるそれらの機能を明らかにすることを目的とした。先行研究においてインフルエンザウイルスのウイルスタンパク質と相互作用することが示唆された宿主因子、かつ、ウイルスの粒子内に取り込まれることが報告されている宿主因子の中から、解析の候補因子を選定した。相互作用するウイルスタンパク質の種類、宿主細胞における機能、粒子内の存在量、等を考慮して28因子を選定し、以下の手順で解析を行った。A549細胞(ヒト肺上皮細胞)にsiRNAを導入し、各宿主因子のノックダウン細胞を準備した。まず、各宿主因子をノックダウンした際の細胞生存率を継時的に測定した。また、siRNA導入細胞にインフルエンザウイルスを感染させ、感染48時間後のウイルス力価をネガティブコントロールsiRNA導入細胞と比較した。ノックダウン後も細胞生存率が十分に維持され、かつ、ノックダウンがウイルス力価の有意な低下をもたらすような因子を探索した。しかしながら、28因子の中で、ウイルス増殖特異的に重要であると思われる因子は見られなかった。これらの因子は、A549細胞でのウイルス増殖には必須ではない可能性がある。ウイルス粒子内には多くの宿主因子が取り込まれており、ウイルス粒子の形成や維持などに関わっている可能性が予想されたが、これらの因子がウイルス増殖において何らかの役割を担っているのかどうかは不明であった。本研究によって、粒子内に取り込まれる因子が、必ずしもウイルス増殖に重要な機能を果たしているわけではないということが明らかとなった。

The function of host factors can be utilized to enhance growth, and the analysis of host factors related to growth is important for a deeper understanding of the growth mechanism of the host. In this study, the host factors involved in the process of reproduction, especially the host particles involved in the process of reproduction, were identified. Study the host factor, analyze the candidate factor, and select the candidate factor in the host factor. 28 factors are considered for the selection of the substance, the function of the host cell, the amount of the particle, etc., and the following procedure is performed. siRNA was introduced into A549 cells (lung epithelial cells) to prepare the cells for host factors. The cell survival rate was determined when the host factors were detected. The cells were infected with siRNA, and 48 hours after infection, the cells were infected with siRNA. To explore the factors that contribute to the maintenance of cell survival after treatment. The 28 factors are important for reproduction. These factors are both necessary and possible for the proliferation of A549 cells. The host factor of the particle is selected according to the probability of its formation and maintenance. In this study, the particle selection factor must be included in the reproduction of important functions.