RNA-binding protein-lncRNA interactions provide new insights into the regulation of endometrial cancer pathology

研究計画に基づき、長鎖非翻訳性RNA(lncRNA)であるDLEU2の発現に重要なRNA結合タンパク質RBP群の同定と機能解析を展開した。具体的には、ChIRP-MS法を用い、DLEU2に結合するRBP候補群を同定した。そして、 複数の体癌細胞株を用い、ビオチン化DLEU2を用いたpull-down法によって、DLEU2に直接に結合するRBP候補群を確認した上で、luciferase assayを使用し、DLEU2配列におけるRBP群（IGF2BP3など）の結合部位を確定した。続いて、これらのRBP群のmRNA高発現は、体癌患者の予後不良と関係していることを発見した。更に、同定されたRBP群の生物的役割について、過剰発現ベクターまたCRISPR/Cas9法による発現抑制法を用いた細胞実験により、体癌悪性化の調節因子としての複数のRBPの関与を明らかにした。特に、IGF2BP3の発現抑制によって、体癌細胞の増殖能、運動能、浸潤能、癌幹細胞形質、抗がん剤に対する抵抗性は、著しく阻害されたことを確認した。また、代表的な体癌細胞株では、複数のRBP（IGF2BP3など）が、DLEU2の配列に直接に結合することを発見した。以上の研究によって、体癌において、IGF2BP3など複数のRBP群は高発現して、そしてこれらのRBP群の高発現は予後不良因子であることを発見した。また、IGF2BP3などのRBPは、体癌細胞の悪性形質を促進できることを証明した。IGF2BP3などのRBPは、DLEU2に直接に結合することを解明した。RBP群とDLEU2の相互作用は、DLEU2の発現亢進を招き、その結果、DLEU2の下流にある癌抑制的microRNA群の発現を低下させ、癌促進的遺伝子経路の活発化を介して、体癌細胞の悪性形質の促進に重要であると予想できる。

研究計画に基づき、長鎖非翻訳性RNA(lncRNA)であるDLEU2の発現に重要なRNA結合タンパク質RBP群の同定と機能解析を展開した。具体的には、ChIRP-MS法を用い、DLEU2に結合するRBP候補群を同定した。そして、 複数の体癌細胞株を用い、ビオチン化DLEU2を用いたpull-down法によって、DLEU2に直接に結合するRBP候補群を確認した上で、luciferase assayを使用し、DLEU2配列におけるRBP群（IGF2BP3など）の結合部位を確定した。続いて、これらのRBP群のmRNA高発現は、体癌患者の予後不良と関係していることを発見した。更に、同定されたRBP群の生物的役割について、過剰発現ベクターまたCRISPR/Cas9法による発現抑制法を用いた細胞実験により、体癌悪性化の調節因子としての複数のRBPの関与を明らかにした。特に、IGF2BP3の発現抑制によって、体癌細胞の増殖能、運動能、浸潤能、癌幹細胞形質、抗がん剤に対する抵抗性は、著しく阻害されたことを確認した。また、代表的な体癌細胞株では、複数のRBP（IGF2BP3など）が、DLEU2の配列に直接に結合することを発見した。以上の研究によって、体癌において、IGF2BP3など複数のRBP群は高発現して、そしてこれらのRBP群の高発現は予後不良因子であることを発見した。また、IGF2BP3などのRBPは、体癌細胞の悪性形質を促進できることを証明した。IGF2BP3などのRBPは、DLEU2に直接に結合することを解明した。RBP群とDLEU2の相互作用は、DLEU2の発現亢進を招き、その結果、DLEU2の下流にある癌抑制的microRNA群の発現を低下させ、癌促進的遺伝子経路の活発化を介して、体癌細胞の悪性形質の促進に重要であると予想できる。