癌関連口腔レンサ球菌由来抗原の感染発癌における病原性の解明

阐明癌症相关口腔链球菌抗原在传染性致癌过程中的致病性

基本信息

批准号：
22K09945
负责人：
下山佑
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Iwate Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

上部消化管の扁平上皮癌発症のリスク因子として口腔常在菌であるStreptococcus anginosus が注目されている．申請者らはこれまでに本菌の病原因子について検討を重ね、本菌が特異的に分泌するTyrosyl-tRNA synthetase (YARS) が，細胞からの炎症性サイトカインや一酸化窒素の産生を誘導する新たな病原因子となることを明らかにしてきている．本研究では，このS. anginosus YARSが変異により強毒化した場合に上部消化管での生物発癌因子となる，との仮説のもと検討を行なった．岩手医科大学分子微生物学分野に保有されているS. anginosus 健常者と癌患者由来臨床分離株計8株について、それらのYARS遺伝子をPCR法により増幅した。得られたPCR産物の精製を行い、DNAシーケンスにより健常者由来株と口腔がん由来株のYARS塩基配列の比較検討を行なった。その結果、健常者由来株と口腔がん由来株ではYARSの塩基配列は98.7%以上の高い相同性を示したものの、口腔がん由来株でのみ共通したアミノ酸変異を認める部位 (position; 286, 304, 384, 392)があることを見出した。また、臨床分離株単離のための培養法についても検討を行い、酢酸を用いてpH5.0に調整したMS寒天培地において生育することを見出した。さらにこの培地では、S. mutansとS. sobrinusを除く口腔レンサ球菌の発育が阻害されることも見出した。今後、臨床分離株のYARS配列の解析を行い、遺伝子組換え体を用いた病原性の検討が行われることにより、上部消化管生物発がんに関わる高病原性のS. anginosusの存在が明らかになるものと考える。

一种正常的口腔细菌，链球菌是链球菌，它吸引了上胃肠道中鳞状细胞癌发展的危险因素。申请人一直在研究该细菌的致病因子，并能够澄清说，该细菌专门分泌的酪蛋白-TRNA合成酶（YARS）是一种诱导细胞炎性细胞因子和细胞氮氧化物的产生的新致病因素。在这项研究中，我们调查了以下假设：如果静脉链链球菌成为胃肠道中部的生物致癌因子，则如果由于突变而变成毒性作用。通过PCR将YARS基因放大，共有八个来自健康的动脉链球菌和癌症患者的临床分离株，这些分离株在Iwate医科大学的分子微生物学领域中保存。将获得的PCR产物纯化，并比较健康个体的YARS碱序列，并通过DNA序列比较了口服癌症衍生的菌株并研究。结果，尽管YAR的基本序列在健康和口腔癌衍生的菌株之间是高度同源的，但仍有一个位点（位置； 286、304、384、392），该部位仅在口腔癌衍生的菌株中显示出一个常见的氨基酸突变。此外，还研究了一种分离临床分离株的培养方法，并发现使用乙酸调节到pH 5.0的MS琼脂培养基上生长。此外，发现抑制了口服链球菌的生长和sobrinus链球菌的生长被抑制。将来，将使用遗传修饰的物质分析临床分离株的YARS序列，并检查致病性，并将揭示与高度致病性的Anginosus相关的高度致病性静脉链球菌的存在。