iPS細胞由来ミクログリア―ニューロン3次元共培養系による自閉症の病態解析

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本研究では、科研費若手研究における、自閉スペクトラム症のミクログリアに発現する造血器型プロスタグランジンD合成酵素（HPGDS）とその産生物であるプロスタグランジンD2（PGD2）に注目して、HPGDS-PGD2経路の神経発生とミクログリアの機能への影響に関する検討を踏まえ、ヒトiPS細胞由来のミクログリア、ニューロンを用いて、ミクログリアにおけるHPGDSの発現量の変化がニューロンの形態・シナプス形成および刈込に及ぼす影響を明らかにすることを目的としている。令和４年度は、前年度のニューロンへの分化に引き続き、HPGDSを強発現するミクログリアに分化するiPS細胞を作成するために必要な、Tet-Onシステムを備えたPiggybac vectorを作成しこれを導入して、HPGDS強発現ミクログリアの作成と、その性質の同定を目標とした。従来行っていた方法で、遺伝子変異を導入してミクログリアに分化させた細胞で、十分にミクログリアマーカーの発現を確認することができなかったため、遺伝子変異を導入したiPS細胞においてミクログリアへの分化誘導を行う方法の見直しを行った。新たなプロトコールを先行研究より作成し、ミクログリアへの分化およびHPGDS発現量をコントロール可能なミクログリアの作成を改めてすすめている。あわせて、マウスの脳のプライマリカルチャーによって得たミクログリアとニューロンを用いて、予備的な検討を行っている。令和5年度は、HPGDS発現量を操作したミクログリアの性質の同定を進めるとともに、ニューロン-ミクログリア共培養による相互作用の解析を行う。