Understanding of the pathophysiology of gastrointestinal allergies and related diseases using microfiber cell isolation

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食物アレルギーや消化管アレルギー患者での末梢血のTリンパ球表面のアレルギーや細胞性免疫に関連する分子の発現について、前年度に続き検討を続けた。また消化管組織での検討のため、好酸球性大腸炎を考え、新規に血便症状で内視鏡検査を行った過去3年間に協力者施設で好酸球性消化管疾患と診断、あるいは疑われた患者検体の病理所見を確認した。約50名の検体から、明らかな組織好酸球増多は約30名存在し、症状、治療との関係も明らかになった。パラフィンブロックが保存されており、多くの症例で研究同意も得られていた。今後の好酸球ETosis関連染色、さらに重要な免疫細胞を同定するための免疫染色、加えて、パラフィンブロックからのRNAの抽出を考え検体リストを作成した。また複数の施設から消化管アレルギーの相談を受け、患者検体での協力者施設、分担者施設での染色をすすめている。さらに今後の遺伝子の網羅的解析での比較のため組織検体を選定した。重要な分子を選定し、遺伝子を限定してパラフィンブロックでmRNAを確認する準備をすすめている。さらに細胞や炎症性分子除去を行う動物実験系を、昨年度から検討しており、ラットで脱血および送血ルートを確保して体外循環をまわし、その途中でマイクロファイバーによるフィルターを通して細胞や分子を分離する系を考えて検討している。温度や内径で侵襲の程度が変わるため、まず体外循環用の回路そのものを検討した。検討後、実際にラットのルートを確保して、脱血、返血を行った。このことにより、ラットの系で採取した血液検体から、安定した状態での経時的な解析が可能になった。分子の解析のための血清を保存した。体外循環系の侵襲が予想以上に強い可能性があり、変化を確認しやすい敗血症モデルなど全身性炎症の強い系でまず分子・細胞の除去の検討をはじめている。