Development of a novel material, lectin-silk, using various types of fish lectins.

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昨年度は、トラフグ由来のペントラキシン(PTX)、ネコザメ由来のC-typeレクチン(HjCL)の2種類のレクチンをレクチンシルクの導入レクチンの候補とした。本年度は新たな魚類のレクチンの候補として、マダイ由来のCq1-likeレクチン（Cq1-like）を選定した。Cq1-likeも他のレククチン分子と同様にマウスDO-11.10細胞へ遺伝子導入後、ウェスタンブロッティングで発現を確認した。次に死菌サンプルをコーティングしたプレートに抗Myc-tag精製キットで精製したCq1-likeを反応させた。対照区と比較し顕著な結合はみられなかったが、菌に対する結合がみられたため、Cq1-likeもレクチンシルクの候補とした。PTX、 HjCL、Cq1-likeの3種類の魚類レクチンとフィブロインＬ鎖を融合した組換えカイコ用のコンストラクトをそれぞれ作製した。これら3種類のコンストラクトを混合し、カイコ卵にマイクロインジェクションした。1回目、425粒にマイクロインジェクションし結果、151頭が孵化し67蛾区のG1を得た。次に213粒にインジェクションし56頭が孵化し10蛾区のG1を得た。3回目、418粒にインジェクションし、120頭が孵化し13蛾区のG1を得た。しかしながら、3回すべてにおいて、組換えカイコは得られなかった。現在、4回目のインジェクションに向けて準備を進めている。また、レクチンシルクの候補となるハタ科の体表粘液レクチンを同定した。今後、このレクチンがレクチンシルクの候補となるのか病原体への結合性を調べる予定である。