微生物が生産する新規ペプチド型フェロモンの探索

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ロドコッカス属細菌、ロドコッカス・エリスロポリスにおいて、非リボソームペプチド生合成遺伝子群と考えられる遺伝子の破壊株のコロニーやバイオフィルムの形成が、野生株と比較して大きく変化した。そのため、該当する非リボソームペプチド生合成遺伝子群が生合成するペプチド様物質が、ロドコッカスの形態変化を引き起こす形態変化誘導物質であると仮定した。昨年2022年度、ロドコッカス・エリスロポリスJCM 2895野生株の培養抽出液を、同遺伝子破壊株に加えて最少培地で培養したところ、遺伝子破壊株の一部の細胞が野生株のように浮遊することが確認できた。しかし、本年度追試をしたのだが、再現性に乏しい結果となった。そこで、まずコンタミネーションの可能性を排除するために、濾過滅菌をおこなった。次に、富栄養培地で予め培養して菌体量を増加させた遺伝子破壊株を用いることにした。すなわち、富栄養培地であるLB培地を用いて30度、72時間振盪培養した後に、野生株の培養抽出液を加えて再び、30度、24時間振盪培養した。その結果、遺伝子破壊株の細胞が野生株と同様の形状に変化することが確認できた。遺伝子破壊株の培養抽出液を用いて同様の操作を行なった場合では形状は変化しなかった。再現性も得られた。したがって、ロドコッカス・エリスロポリスJCM 2895野生株の培養液には形態変化物質が含まれていることが明らかとなった。現在、野生株の培養抽出液を分画して、各画分を用いた生物検定を行っているところである。