真の性決定遺伝子Sry-Tよる性決定の転写制御メカニズムの解明
真正的性别决定基因Sry-T阐明性别决定的转录控制机制
基本信息
- 批准号:21K19262
- 负责人:
- 金额:$ 4.16万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-07-09 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
転写因子が標的遺伝子を活性化または抑制する際には、各々が標的に応じた適切な結合パートナーと複合体を形成することが重要である。ほ乳類Y染色体上の遺伝子Sryは、雄への分化を誘導する性決定のマスター転写因子である。しかし、1991年にSryが発見されてから約30年が経つにも関わらず、Sryが雄分化を誘導する際の機能的な結合パートナーは未だに同定されていない。本研究では、真の性決定遺伝子Sry-Tと結合するタンパク質をBioID法で同定し、Sry-Tによる性決定の転写制御メカニズムの解明することを目的とする。今年度は、Biotin化酵素AirIDをSry-T遺伝子座にノックインしたマウスを作製した。しかし、このマウスは雄から雌への性転換の表現型を示し、系統を樹立することが出来なかった。そこで、代替案として、Biotin化酵素TurboIDを連結したSry-T (Sry-T-TurboID)またはNLSを付加したTurboID (TurboID-NLS)を強制発現するES細胞株を樹立した。これらの細胞を用いてBioIDによるMS解析で相互作用タンパク質を同定し、Sry-T-TurboIDとTurboID-NLSのスコア比からSry-Tに特異的に相互作用するタンパク質のリストを作成した。得られた遺伝子リストを、申請者が既に取得している胎生11.5日生殖腺の遺伝子発現データと照合し、特に生殖腺に発現するSry-T結合クロマチン因子の候補として2つの遺伝子を特定した。
The target gene is activated, and the target gene is combined with the target gene to form a complex. The gene Sry on the Y chromosome of the mammary gland induces sexual differentiation. Since 1991, Sry has been developing for about 30 years. It has been a combination of male differentiation and induction functions. The purpose of this study is to determine the identity and identity of the Sry-T gene and its association with the BioID method This year, Biotin enzyme AirID Sry-T gene base is used to control it. The male and female sex change phenotypes are expressed and the system is established. ES cell lines were established under stress by adding TurboID (TurboID-NLS) to Sry-T (Sry-T-TurboID) and NLS. MS analysis of the interaction between BioID and TurboID in these cells is performed in the same way as Sry-T-TurboID and TurboID-NLS. The candidate for the candidate gene is selected by the candidate gene and the candidate gene is selected by the candidate gene.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Masakazu Hashimoto;Rui Shibata;Karin Konno;Hiroshi Sasaki;Yuuki Shikaya;黒木俊介
- 通讯作者:黒木俊介
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