真の性決定遺伝子Sry-Tよる性決定の転写制御メカニズムの解明

真正的性别决定基因Sry-T阐明性别决定的转录控制机制

• 批准号: 21K19262
• 负责人: 黒木 俊介
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19262/
• 关键词: 性決定

転写因子が標的遺伝子を活性化または抑制する際には、各々が標的に応じた適切な結合パートナーと複合体を形成することが重要である。ほ乳類Y染色体上の遺伝子Sryは、雄への分化を誘導する性決定のマスター転写因子である。しかし、1991年にSryが発見されてから約30年が経つにも関わらず、Sryが雄分化を誘導する際の機能的な結合パートナーは未だに同定されていない。本研究では、真の性決定遺伝子Sry-Tと結合するタンパク質をBioID法で同定し、Sry-Tによる性決定の転写制御メカニズムの解明することを目的とする。今年度は、Biotin化酵素AirIDをSry-T遺伝子座にノックインしたマウスを作製した。しかし、このマウスは雄から雌への性転換の表現型を示し、系統を樹立することが出来なかった。そこで、代替案として、Biotin化酵素TurboIDを連結したSry-T (Sry-T-TurboID)またはNLSを付加したTurboID (TurboID-NLS)を強制発現するES細胞株を樹立した。これらの細胞を用いてBioIDによるMS解析で相互作用タンパク質を同定し、Sry-T-TurboIDとTurboID-NLSのスコア比からSry-Tに特異的に相互作用するタンパク質のリストを作成した。得られた遺伝子リストを、申請者が既に取得している胎生11.5日生殖腺の遺伝子発現データと照合し、特に生殖腺に発現するSry-T結合クロマチン因子の候補として2つの遺伝子を特定した。

Planning to write factor が mark heritage 伝 son を activeness ま た は inhibit す る interstate に は, various 々 が mark に 応 じ た appropriate な combining パ ー ト ナ ー と complex を form す る こ と が important で あ る. The 伝 offspring Sry スタ and male へ on the Y chromosome of ほ milk を differentiation を induction する determines the <s:1> スタ スタ 転 転 writing factor である. し か し, 1991 に Sry が 発 see さ れ て か ら about 30 years が 経 つ に も masato わ ら ず, Sry が を male differentiation inducing す る interstate の function な combined パ ー ト ナ ー は not だ に with fixed さ れ て い な い. This study で は son, true の decision but 伝 Sry -t と combining す る タ ン パ ク qualitative を で BioID method with し, Sry -t に よ る sex determination の planning write suppression メ カ ニ ズ ム の interpret す る こ と を purpose と す る. This year, た and Biotin enzyme AirIDを siri-t are used to produce 伝 た, <s:1>, <s:1>, <s:1>, た, た, ウスを and ウスを. し か し, こ の マ ウ ス は male か ら female へ の sex planning in の phenotype を を し, system set up す る こ と が out な か っ た. そ こ で, instead of case と し て, Biotin enzyme TurboID を link し た Sry -t (Sry - T - TurboID) ま た は NLS を plus し た TurboID (TurboID - NLS) を forced 発 now す る ES cell lines を set し た. こ れ ら の cells を using い て BioID に よ る MS analytical で interaction タ ン パ ク qualitative を with し, Sry - T - TurboID と TurboID - NLS の ス コ ア than か ら Sry -t に specific に interaction す る タ ン パ ク qualitative の リ ス ト を made し た. Son to ら れ た heritage 伝 リ ス ト を, which applicants が に get し て い る viviparous 11.5 day gonad の heritage 伝 son 発 now デ ー タ と according し, especially に gonad に 発 now す る Sry -t combining ク ロ マ チ ン factor の alternate と し て 2 つ の heritage 伝 son を specific し た.

项目成果

全能性獲得における母性H3K9脱メチル化酵素 Jmjd1a/bの解析

母体 H3K9 去甲基化酶 Jmjd1a/b 在全能性获得中的分析

• 发表时间: 2021
• 作者: Masakazu Hashimoto;Rui Shibata;Karin Konno;Hiroshi Sasaki;Yuuki Shikaya;黒木俊介
• 通讯作者: 黒木俊介