Drug discovery targeting SLFN11 the enhancer of sensitivity to DNA-damaging anti-cancer agents

针对 DNA 损伤性抗癌药物敏感性增强剂 SLFN11 的药物发现

• 批准号: 21K19415
• 负责人: 村井 純子
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19415/
• 关键词: 抗がん剤; DNA障害; SLFN11; 薬剤耐性; 薬剤感受性; ドラッグスクリーニング; 遺伝子発現; ヒストン脱アセチル化阻害剤; 薬剤スクリーニング; 耐性; HDAC阻害剤; 複製ストレス

Schlafen 11 (SLFN11)は、大規模がんデータベースの解析から、DNA障害型の抗がん剤の感受性とmRNA発現量が最も相関する遺伝子として報告された。それ以降、様々ながん種において、SLFN11の発現量がDNA障害型の抗がん剤の効果予測バイオマーカーとして有用であることが報告されている。これらの背景から、SLFN11の発現を高める薬剤を開発し、それにより抗がん剤感受性を増強し、non-responderを無くすことが本研究の目的である。一部のepigenetic modulatorsにその作用が報告されているが、SLFN11以外の遺伝子発現にも、多大な影響を与えるため、それ以外のカテゴリーの薬剤を探索する必要がある。本研究では、まず細胞ベースの薬剤スクリニーングの系を立ち上げた。定常状態ではSLFN11の発現が低く抑えられている細胞SLFN11遺伝子のATG直下に、ルシフェラーゼの断片となるHiBiT配列をCRISPR/Cas9システムを用いて挿入した。約4000種類の薬理活性をもつドラッグライブラリーを用いて、薬剤投与後16時間後にルシフェラーゼシグナルが高まる、つまりSLFN11のタンパク質レベルが高まる薬剤を同定した。同定した薬剤には、既知のepigenetic modulatorsであるヒストン脱アセチル化阻害剤が数種類含まれていた。別のカテゴリーの薬剤XとYも同定できた。本年度は、実際タンパク質レベルでSLFN11を高めるための、ドーズや時間経過について、二種類の細胞を用いて検討して、結果を得た。化合物XがSLFN11の発現を高めるパスウェイを、RNA-seqやシグナル阻害剤などを利用して特定した。

Schlafen 11 (SLFN11) は, large-scale が ん デ ー タ ベ ー ス の parsing か ら, DNA handicap of type の が ん tonic の susceptibility と mRNA 発 quantity が now most も phase masato す る posthumous son 伝 と し て report さ れ た. そ れ to drop and others 々 な が ん kind に お い て, SLFN11 の 発 now quantity type が DNA handicap of の resistance が ん tonic の unseen fruit be バ イ オ マ ー カ ー と し て useful で あ る こ と が report さ れ て い る. こ れ ら の background か ら, SLFN11 の 発 now を high め る 薬 tonic を open 発 し, そ れ に よ り resistance が ん tonic susceptibility を raised strong し, non - responder を no く す こ と が の purpose this study で あ る. A の epigenetic modulators に そ の role が report さ れ て い る が, SLFN11 の posthumous son 伝 発 now に も, how big な を and え る た め, そ れ outside の カ テ ゴ リ ー の 薬 tonic を explore す る necessary が あ る. This study で は, ま ず cells ベ ー ス の 薬 tonic ス ク リ ニ ー ン グ の を made ち fasten げ た. Steady state で は SLFN11 の 発 now が low く え suppression ら れ て い る cells SLFN11 heritage 伝 son の way down the ATG に, ル シ フ ェ ラ ー ゼ の fragment と な る HiBiT match column を CRISPR/Cas9 シ ス テ ム を with い て scions into し た. About 4000 species の 薬 manage active を も つ ド ラ ッ グ ラ イ ブ ラ リ ー を with い て, 薬 tonic cast with 16 time after に ル シ フ ェ ラ ー ゼ シ グ ナ ル が high ま る, つ ま り SLFN11 の タ ン パ ク qualitative レ ベ ル が high ま る 薬 tonic を be し た. With fixed し た 薬 tonic に は, both known の epigenetic modulators で あ る ヒ ス ト ン ア off セ チ ル chemical resistance against が several species contain ま れ て い た. Do not use <s:1> カテゴリ and カテゴリ drugs. The drug Xと and Y で are also prescribed at で and た. は this year, the event be タ ン パ ク qualitative レ ベ ル で SLFN11 を high め る た め の, ド ー ズ や time 経 に つ い て を の cells, 2 species use い て beg し 検 た を て, results. Compound X が SLFN11 の 発 now を high め る パ ス ウ ェ イ を, RNA - seq や シ グ ナ ル resistance against tonic な ど を using し て specific し た.