Drug discovery targeting SLFN11 the enhancer of sensitivity to DNA-damaging anti-cancer agents

针对 DNA 损伤性抗癌药物敏感性增强剂 SLFN11 的药物发现

• 批准号: 21K19415
• 负责人: 村井 純子
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19415/
• 关键词: 抗がん剤; DNA障害; SLFN11; 薬剤耐性; 薬剤感受性; ドラッグスクリーニング; 遺伝子発現; ヒストン脱アセチル化阻害剤; 薬剤スクリーニング; 耐性; HDAC阻害剤; 複製ストレス

Schlafen 11 (SLFN11)は、大規模がんデータベースの解析から、DNA障害型の抗がん剤の感受性とmRNA発現量が最も相関する遺伝子として報告された。それ以降、様々ながん種において、SLFN11の発現量がDNA障害型の抗がん剤の効果予測バイオマーカーとして有用であることが報告されている。これらの背景から、SLFN11の発現を高める薬剤を開発し、それにより抗がん剤感受性を増強し、non-responderを無くすことが本研究の目的である。一部のepigenetic modulatorsにその作用が報告されているが、SLFN11以外の遺伝子発現にも、多大な影響を与えるため、それ以外のカテゴリーの薬剤を探索する必要がある。本研究では、まず細胞ベースの薬剤スクリニーングの系を立ち上げた。定常状態ではSLFN11の発現が低く抑えられている細胞SLFN11遺伝子のATG直下に、ルシフェラーゼの断片となるHiBiT配列をCRISPR/Cas9システムを用いて挿入した。約4000種類の薬理活性をもつドラッグライブラリーを用いて、薬剤投与後16時間後にルシフェラーゼシグナルが高まる、つまりSLFN11のタンパク質レベルが高まる薬剤を同定した。同定した薬剤には、既知のepigenetic modulatorsであるヒストン脱アセチル化阻害剤が数種類含まれていた。別のカテゴリーの薬剤XとYも同定できた。本年度は、実際タンパク質レベルでSLFN11を高めるための、ドーズや時間経過について、二種類の細胞を用いて検討して、結果を得た。化合物XがSLFN11の発現を高めるパスウェイを、RNA-seqやシグナル阻害剤などを利用して特定した。

Schlafen 11 (SLFN11) reported that large-scale gene analysis was the most relevant gene for DNA damage resistance and mRNA expression. The detection of SLFN11 and the detection of DNA damage resistance are reported in this paper. This is the purpose of this study. The background of this study is that SLFN11 is highly developed, non-responder and non-responder. The role of some epigenetic modulators is reported in the report, and it is necessary to explore the role of epigenetic modulators other than SLFN11 in the report. This study was conducted to investigate the relationship between cell cycle and cell cycle. In the steady state, SLFN11 expression is low, and the expression of SLFN11 gene is low. In the steady state, SLFN11 gene expression is low, and the expression of SLFN11 gene is high. In the steady state, SLFN11 gene expression is low. In the steady state, SLFN11 gene expression is high. In the steady state, SLFN11 gene expression is low. In the steady state, SLFN11 gene expression is low. In the steady state, SLFN11 gene expression is low. In the steady state, SLFN11 gene expression is low. In the steady state, SLFN11 gene expression is high. In the steady state, SLFN11 gene expression is low. In the steady state, SLFN11 gene expression is low. In the steady state, SLFN11 gene expression is low. In the steady state, SLFN11 gene expression is high. In the steady state, SLFN11 gene expression is high. About 4000 species of biological activity were tested in the middle of the test, and 16 hours after the test, the activity of SLFN 11 was tested in the middle of the test, and the activity of SLFN11 was tested in the same way. In the same way, there are several types of known epigenetic modulators that can be used to isolate and isolate groups of chemicals. The name of the game is X and Y. This year, the quality of SLFN11 has been improved, the time has passed, and two types of cells have been used. Compound X was found to be a highly effective inhibitor of SLFN11.