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大気粉塵の炎症反応誘発性と喘息発作の関係の解明

阐明大气尘埃引起的炎症反应与哮喘发作之间的关系

基本信息

批准号：
21K12271
负责人：
渡辺徹志
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Kyoto Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

大気浮遊粒子状物質（PM10）の上皮サイトカインであるthymic stromal lymphopoietin (TSLP)誘導能を明らかにするとともにTSLP誘導能とPM10中の成分との関係について検討を行った。TSLP誘導能を測定するため、TSLP遺伝子のプロモーター領域をホタルルシフェラーゼ遺伝子をレポーター遺伝子とするプラスミドベクターに組み込むことでレポータープラスミドを作製し、これをラット気管上皮EGV-4T細胞に導入した。本細胞におけるTSLP遺伝子プロモーター活性を12-O-tetradecanonylphorbol 13-acetate (TPA)あるいはエンドトキシンを用いて試験した結果、それらによる処置2時間後からTSLP遺伝子プロモーター活性が上昇し、処置6～8時間で最大となり、TPA 1～10 ng/mL、エンドトキシン 1～10 EU/mLの範囲でプロモーター活性は用量依存的に上昇した。また、TSLP遺伝子プロモーター活性を捕集時期の異なる2種類のPM10を用いて試験した結果、いずれのPM10についても大気8.8～35.0 m3に相当するPM10の水抽出物によりプロモーター活性は用量依存的に上昇し、活性は陰性対照の細胞におけるそれと比較して有意に高かった。また、PM10中のエンドトキシン濃度をLALアッセイにより測定したところ、いずれのPM10からもエンドトキシンが検出され、TSPLプロモーター活性にエンドトキシンが関与することが示唆された。以上の結果から本細胞を用いることにより微量のPM10からの抽出物によるTSLP遺伝子の発現誘導を検出することが可能であると考えられた。

The relationship between TSLP induced energy and PM10 composition was discussed. TSLP induction energy determination, TSLP gene expression domain, TSLP gene expression domain, TSLP gene expression domain. The activity of TSLP protein was increased after 2 hours of treatment. The activity of TSLP protein was increased after 6~8 hours of treatment. The activity of TSLP protein was increased in a dose-dependent manner in the range of 1~10 ng/mL of TPA and 1 ~10 EU/mL of TPA. The activity of TSLP-derived PM10 in water extracts increased dose-dependently, while the activity of TSLP-derived PM10 in negative cells increased intentionally. PM10 concentration is measured by LAL, PM10 concentration is detected by LAL. The above results show that PM10 can be induced in small amounts by TLP gene.