A novel design methodology for the construction of functionalized human cell monolayer on an egg

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ニワトリ胚の漿尿膜はニワトリ胚にとって必要な物質を外部から取り入れたり，不要な物質を体内から外部に排出したりする役割を担っている．この役割はヒトの上皮細胞とは異なる可能性があるため薬物の拡散の評価に適していないと考えられる．そのため，漿尿上の細胞を一部のみ除去し，そこにヒト由来細胞を播種することでヒトの環境により近い状態で薬物拡散などについて実験できると考えている.電界誘起気泡を用い上皮細胞を局所的に除去できた．印加電圧を500V，パルス幅を4 マイクロ秒，パルス感覚を0.1ミリ秒，サイクル数を10，デバイスと対象物の距離を200マイクロメートルとした電界誘起気泡を用いることで，直径約350マイクロメートルの範囲でニワトリ胚漿尿膜上の細胞を除去できることを確認できた．生成した気泡の直径は約400 マイクロメーターであり，細胞除去の範囲と一致する．また，気泡の成長，収縮，圧壊による物理的刺激の大きさを評価する実験では，直径が400マイクロメートルの電界誘起気泡では気泡の圧壊時に生じるマイクロジェットよりも気泡の成長時により大きな物理的刺激を与えられることが分かっており，その力は0.4mN程度である．直径400マイクロメートルの範囲でこの力が加わっていることから，3200Paの応力がかかっていることが分かる．これは上皮細胞の除去に必要である800Paより大きな応力がかかっているため，気泡を用いた細胞除去はこの応力に起因すると考えることができる.また、しょう尿膜をカバーするために使用するナノシートの作製工程を確認した．LMH細胞（鶏肝細胞がん細胞）とヒト臍帯静脈内皮細胞を培養した。電界誘起気泡によって引き起こしたせん断力（機械刺激）のレベルを調べた.