核酸医薬密生型キャリアフリーDDSを活用したナノ粒子点眼薬の開発

点击翻译按钮获取中文摘要

本研究課題は、低分子治療薬オリゴマーを内核とした核酸医薬密生型キャリアフリーDDS製剤を眼科製剤に応用できる基盤技術の確立を目的としている。そのため、特定の環境下で核酸医薬をリリースする戦略が構造設計で求められる。今年度は、内核を自己崩壊性高分子とし、かつ細胞内還元環境下で自己崩壊を誘起できるナノ構造体の新規作製を含め、以下の2課題（aとb）を実施した。これら研究課題は学会および論文にて成果報告をおこなった。（a）還元環境で自己崩壊を誘起するDNA密生型ナノ構造体の精密設計：ジスルフィド誘導体を末端に有する自己崩壊性ポリ（カルバメート）－DNA（SS-PC-DNA）コンジュゲートを新規に設計し、その合成を試みた。得られたコンジュゲートを透析法により自己組織化させた。動的光散乱測定により粒径約100 nmの単分散なナノ構造体を得ることに成功した。（b）簡易分析向けDNA-金ナノ粒子コンジュゲートの作製：二重鎖（ds）DNA固定化金ナノ粒子（dsDNA-AuNP）を用いて酵素活性と低分子医薬の薬物活性を目視検出できる簡易分析法の開発を推進した。前者においては、昨年度に合成したガラクトース（β-Gal）型末端修飾剤を粒子の表層部に導入することに成功した。後者では、これまでにdsDNA-AuNPの最表層部に抗がん剤（ここではブレオマイシン（BLM））が切断する配列を組み込むことで、その切断活性の目視検出を可能にした。今年度は再現性の確認を兼ねて、切断配列をもたない粒子との比較実験を実施し、ナノ粒子の色変化がBLMの配列特異的な切断に基づいたものであることを実証した。また、金ナノ粒子を消光剤とした1分子鎖の分子ビーコン-金ナノ粒子コンジュゲートを作製し、腫瘍マーカーの蛍光検出に成功した。