アミラーゼ分泌能を可視化・数値化可能な光る耳下腺培養細胞系の構築

构建可可视化和量化淀粉酶分泌能力的发光腮腺培养细胞系

• 批准号: 22K10293
• 负责人: 関亦 明子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10293/
• 关键词: 唾液腺; 放射線照射; 唾液分泌低下; 耳下腺; アミラーゼ; がん支持療法; 初代培養

がん治療において有害事象のひとつである唾液分泌障害は予防が第一であり、支持療法として唾液腺防護剤をがん治療時に同時に使用することが効果的である。唾液腺防護剤の開発には、唾液腺の機能を可視化・数値化できる唾液腺培養系と薬効の検証のために動物モデルが必須となる。そこで、我々はがん治療で特にその傷害が問題となる耳下腺とその機能を反映するアミラーゼ分泌に注目して、これまでに“蛍光耳下腺マウス”を作製した。本研究では、長期培養で唾液分泌能が低下するというこれまでの問題点を克服し、唾液腺の機能を可視化・数値化できる光る耳下腺培養系をこの蛍光耳下腺マウスから単離した耳下腺細胞を利用して構築することと、マウス個体を放射線障害の動物モデルとして確立することで、既知の抗酸化剤の唾液腺防護効果を判定することを目指している。本年度は、放射線障害モデルマウス作製のための条件検討を行った。検討した事項は、1）実験に使用するマウスの週齢と性別、2）照射するX線の強度、3）X線照射後の飼育日数、4）唾液腺組織傷害の程度、5）傷害を判定するために用いる指標について、であった。その結果、1）使用するマウスは８週齢のICRメスとした。2）放射線の強度は10 Gyから30 Gyまでとしたところ10 Gyでも唾液分泌低下や体重の低下がみられていた。3）X線照射後の飼育日数は30日までとした。30 Gyの照射でも30日後にマウスの生存が確認された。4）唾液腺組織傷害はこれまでに肉眼的には観察されていない。5）今後、組織の免疫染色によるアポトーシスやDNA損傷の程度の可視化、繊維化の程度を観察する予定である。

The first treatment is for salivary gland protection. The second treatment is for salivary gland protection. The development of salivary gland protective agents is necessary for visualization and quantification of salivary gland functions. The treatment of this disease can be controlled by the function of the ear gland. In this study, the problem of low salivary secretion in long-term culture was overcome, the function of salivary glands was visualized and quantified, and the auricular gland culture system was constructed by using auricular gland cells. The results of salivary gland protection with known anti-acidification agents are described in this paper. This year, the radiation barrier is under discussion. Items to be discussed include: 1) Use of the test, week and sex, 2) Intensity of X-ray exposure, 3) Number of days of incubation after X-ray exposure, 4) Degree of salivary gland tissue injury, 5) Determination of injury, and use of indicators. Results 1) Use of ICR for 8 weeks 2) The intensity of radiation is from 10 Gy to 30 Gy. The saliva secretion is low and the weight is low. 3) The number of breeding days after X-ray irradiation is 30 days. After 30 Gy of irradiation, it was confirmed that 4) Salivary gland tissue injury is not detected by naked eye. 5) In the future, the degree of DNA damage can be visualized and observed by immunostaining of tissues.