The elucidation of ICR development via estrogen-NFAT signaling and the establishment of its remedy

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軟骨細胞ATDC5を文化誘導させ、エストロゲンレセプター（ERαとERβ）の発現パターンを確認した。ERαは分化誘導7日でやや増加するがその後減少した。一方ERβは分化14日を最大として発現亢進したが、ERαより平均的に発現量が多かった。また分化誘導17日目と21日目において蛍光免疫染色にて軟骨細胞の細胞膜および細胞質内にて同タンパク発現を確認した。次にATDC5を培養細胞伸展機（Flexer Strain Unit）を用いて、細胞に機械的刺激を付与した。これまでの研究結果と同様に、刺激付与後24h前後で有意に炎症性サイトカインの発現が更新した。現在はエストロゲンの添加濃度の検討およびエストロゲンレセプターブロッカーの選定に入っている。機械的刺激を付与した軟骨細胞に対し、エストロゲン投与が炎症の発現の観点では相乗的に機能すると予想される。炎症の発現に関してエストロゲンの関与が明らかになった時点で、炎症発現の詳細なメカニクス（シグナリング経路）の検討に入る。これまで明らかとなっているp-38, ERK, JNK経路の他、NFATC1～5に関連した経路を探索する。現在NFATCとエストロゲン経路にクロストークがあるか予備検討に入っている。ATDC5に各種濃度を振ったエストロゲンを添加し、NFATCの脱リン酸化が生じるかウェスタンブロッティング法にて確認する。また脱リン酸化が確認された後は上記ブロッカーの脱リン酸化阻害が生じるかについて検討する。上記in vitro実験系と同時に別の研究分担者によりin vivo用モデルラットの作製はすでに終了しており、安定供給が可能な状態になっている。よってin vitroでの結果および濃度判定をすぐにvivoへフィードバックさせることが可能な状態である。