Development of a new method of drug toxicology for severe decomposed cases based on forensic entomotoxicology

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本研究の研究計画では、本年は法医解剖例の腐敗事例において死体に付着するハエなどの蛆、蛹、蛹の殻から薬毒物を抽出し、同事例における血液、尿、胸腔内貯留液等の採取可能である体液とともに高速液体クロマトグラフ質量分析装置（LC-MS）や探針エレクトロスプレーイオン化質量分析装置（PESI-MS）による薬毒物の定性・定量分析法の開発を行う予定であった。体液検体の分析前処理（薬毒物の抽出処理）は当教室で実施している分散型固相抽出法（dSPE）であるQuEChERS法を用いた。蛆、蛹、蛹の殻などの固体ではビーズクラッシャーを使用して溶媒中で破砕することで抽出を行い、続いて体液検体と同様のQuEChERS法を用いて前処理を行って通常のLC-MS（ESI-LC-MS/MS）による薬毒物分析を行った。以上の方法により体液中において高濃度の薬毒物が検出された事例で蛆や蛹からも同じ薬毒物が検出されることが確認された。一方、PESI-MSでの分析ではLC-MSの前処理を行った分析サンプル（液体）をそのまま用いて分析を行うことが可能であるが、さらに体液検体では抽出溶媒を添加するのみの簡易的な前処理で分析が可能であることを確認した。蛆などの固体検体は、理論的にはそのまま分析を行うことも可能と思われるが、薬毒物の抽出およびイオン化を促進するため溶液を加えることで飛躍的に感度が上がることが分かった。その溶液は薬毒物の極性に関わらず抽出・溶解できるように水とアルコールなどの水溶性の有機溶媒の混合溶液が望ましく、場合によっては、正イオン（陽イオン）で検出されやすい物質と負イオン（陰イオン）で検出されやすい物質で添加するイオン化促進物質の組成を変えるとさらに感度を高める可能性が示された。