間歇型一酸化炭素中毒の病態解明及び治療の究明

间歇性一氧化碳中毒的病理学和治疗的阐明

基本信息

批准号：
20K07971
负责人：
越智紳一郎
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-11-15 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

間歇型CO中毒は、発症者数が多く重篤な認知機能障害を呈するが、その発現機序は不明であり、治療法も確立されていない。病態解明と有効な診断・治療法開発に繋げるために、CO曝露がミクログリアおよび末梢血における遺伝子発現に及ぼす変化を網羅的に解析すること、これまでの我々の研究で示された間歇型CO中毒モデルラットにおけるニコチン性アセチルコリン受容体の発現低下を基に、ニコチン性アセチルコリン受容体のアップレギュレーション作用を有するガランタミンのCO曝露による認知機能障害への効果を検討すること、特に我々のこれまでの研究で示された成体海馬神経細胞新生における影響を検討することが、本研究の目的である。6週齢の雄性Wisterラットをチャンバーに入れ、1000ppmで40分、3000ppmで20分、その後10000ppmでラットが意識消失するまで、COを曝露し間歇型CO中毒モデルを作成した。また、コントロール群として、同様にチャンバーに1時間入れておくAir群も作成した。CO曝露ラットの認知機能変化を、受動回避試験による行動解析によって、群間比較評価し、CO群で低下するラットが優位に多いことを確認した。3週間後、ラットの脳組織を単細胞懸濁液に分散し、ミクログリア特異的抗体を用い、マグネットソーティングを行い、ミクログリアを単離した。さらに、セルソーターによりミクログリアが単離できていることを確認した。単離したミクログリアを用いてAir群及びCO群のミクログリアの代謝能を調べた。その結果、CO群はミクログリアの代謝能がAir群と比較して3週間後も低下していることを見出した。

间歇性CO中毒具有大量病例和严重的认知功能障碍，但其表现的机制尚不清楚，尚未确定治疗方法。 To help clarify the pathology and develop effective diagnosis and treatment methods, the purpose of this study is to comprehensively analyze the changes that CO exposure affects gene expression in microglia and peripheral blood, and to investigate the effects of galantamine, which has an upregulation effect of nicotinic acetylcholine receptors in rats with intermittent CO poisoning model, based on the reduced expression of nicotinic acetylcholine receptors in rats如我们先前的研究中所示，与间歇性的CO中毒模型有关CO暴露引起的认知功能障碍，特别是我们先前的研究中对成人海马神经发生的影响。将六周大的雄性翼大鼠放在腔室中并暴露于CO，直到大鼠以1000 ppm的速度失去40分钟的意识，3000 ppm，持续20分钟，然后在10000 ppm处失去意识，然后创建了间歇性的CO中毒模型。此外，还准备了一个空气组作为对照组，该对照组被放置在腔室中一个小时。通过使用被动回避测试的行为分析评估暴露于CO的大鼠的认知变化，并证实CO组水平降低的大鼠数量降低。三个星期后，将大鼠脑组织分散在单细胞悬浮液中，并通过使用小胶质细胞特异性抗体分类小胶质细胞。此外，已经证实了小胶质细胞可以通过细胞分类器分离。使用分离的小胶质细胞研究了空气和CO组小胶质细胞的代谢潜力。结果，我们发现与空气组相比，即使在3周后，CO组中小胶质细胞的代谢潜力也会降低。