次世代胚盤胞補完法と大動物を用いた機能的な唾液腺の創生

利用下一代囊胚互补法和大型动物创建功能性唾液腺

• 批准号: 21KK0290
• 负责人: 田中 準一
• 金额: $ 9.65万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (A))
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022 至 2023
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21KK0290/
• 关键词: 唾液腺; iPS細胞; 胚盤胞補完; 臓器サイズ; 胚盤胞補完法; 大動物

本年度は本研究課題の目的である、次世代胚盤胞補完のために必要となる唾液腺欠損モデルマウスの探索を試みた。すでにFGFR2のノックアウトマウスでは唾液腺が欠損される報告がなされているが、より唾液腺に限定的な表現型を示すマウスモデルを探索した。具体的には胎生8.5日、9.5日、12.0日マウスの寄託されたscRNAseqのデータの解析を行い、Surface Ectodermのcluster内で口腔粘膜の遺伝子発現パターンを示す集団を同定した。それらの細胞集団より胎生8.5日および9.5日より発現を示す遺伝子をCreドライバー遺伝子として使用しFGFR2をコンディショナルにノックアウトしたマウスの唾液腺の表現型を解析した。すでに3つのマウス系統についてドライバー遺伝子のlineage tracingおよびFGFR2のコンディショナルノックアウトの解析を行っており、そのうちの1つのマウスでは胎生9.5日より口腔粘膜上皮が標識され、胎生15.5日の唾液腺上皮全体が標識されることが明らかとなった。またFGFR2のコンディショナルノックアウトの解析では、胎生15.5日で唾液腺が欠損していることも確認された。またこのコンディショナルノックアウトマウスはFGFR2の全身性ノックアウトでみられる四肢の無形成はみられず、より唾液腺に限定的な表現型を示すことが明らかとなった。これらの結果は本研究課題の土台となる次世代胚盤胞補完のためのマウスモデルが同定されたことを示している。次年度よりこの唾液腺欠損マウスの胚盤胞を用いて多能性幹細胞の補完実験を遂行できる。

The purpose of this year's research project is to make an attempt to explore the salivary glands after the completion of the second generation of embryos. FGFR2, salivary glands, salivary glands. On the 8.5th, 9.5th and 12.0th day of birth, the scRNAseq was parsed, and the oral mucous membrane of the Surface Ectoderm cluster was detected. The baby was born 8.5 days after birth, 9.5 days after birth, and the results showed that the baby Cre was born in the first place, and the paraffin was analyzed in the form of the salivary gland table. The whole body of the oral mucosal epithelium was born 9.5 days after birth, and the salivary gland epithelium was born 15.5 days later. The oral mucosal epithelium was born 9.5 days after birth, and the salivary gland epithelium was born 15.5 days later. The oral mucosal epithelium was born 9.5 days later. The salivary gland epithelium was born 15.5 days. FGFR2

项目成果

Conditional blastocyst complementation of a defective Foxa2 lineage efficiently promotes generation of the whole lung

有条件的囊胚互补有缺陷的 Foxa2 谱系可有效促进整个肺的生成

• DOI: 10.1101/2022.10.31.514628
• 发表时间: 2022
• 期刊: bioRxiv
• 作者: Miura Akihiro;Sarmah Hemanta;Tanaka Junichi;Hwang Youngmin;Sawada Anri;Shimamura Yuko;Fang Yinshan;Shimizu Dai;Ninish Zurab;Suer Jake Le;Dubois Nicole C.;Davis Jennifer;Toyooka Shinichi;Wu Jun;Que Jianwen;Hawkins Finn J.;Lin Chyuan-Sheng;Mori Munemasa
• 通讯作者: Mori Munemasa