摂取した食品成分等が大腸上皮細胞の活性酸素産生系Nox1に及ぼす影響の総括的解析

综合分析摄入食物成分对结肠上皮细胞活性氧产生系统Nox1的影响

• 批准号: 22K02173
• 负责人: 菊池 秀彦
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Shokei Junior College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2027-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K02173/
• 关键词: 活性酸素; 大腸細胞; 白血球; フィトケミカル; 定量性ＰCＲ; 大腸上皮細胞; 腸管細胞; Nox1; 食品成分

本年度は、まず、ヒト大腸癌培養細胞のNox1及びその関連分子（NoxA1, NoxO1, p22-phox）の遺伝子について、それらの発現量（転写量）を定量性PCR法（qPCR）で定量するシステムの確立に取り組んだ。調査した細胞株のうち、JCRB細胞バンクより提供いただいたヒト大腸癌由来のDLD-1細胞はこれら全ての遺伝子を発現しており、今回の実験目的に合致することが分かった。次に、DLD-1細胞を種々の分化誘導剤（レチノイン酸、活性型ビタミンD3及びインターフェロンγ）で処理した後に、Nox1及びその関連分子（NoxA1, NoxO1, p22-phox）の遺伝子の発現量を定量した。その結果、レチノイン酸がNox1の転写量を約2倍に増強することが明らかとなった。これらの結果を受けて、細胞としてDLD-1、分化誘導剤としてレチノイン酸を用いてNox1及びその関連分子（NoxA1, NoxO1, p22-phox）の遺伝子発現の変化を評価するシステムの構築が完了した。次に、DLD-1細胞を種々のフィトケミカル＋レチノイン酸で処理した際のNox1及びその関連分子（NoxA1, NoxO1, p22-phox）の遺伝子発現量を調べたところ、特にスルフォラファンが顕著な抑制効果を示した。来年度以降は、対象となるフィトケミカルの種類を増やして、それらの効果を検証して行く予定である。一方、フィトケミカルが白血球の活性酸素産生系Nox2に及ぼす影響の解析については、緑茶の旨味成分として知られるL-テアニンがこれを強力に活性化することを見いだし、Microbiology and Immunology誌に発表した（Kikuchi H. et al., Microbiol. Immunol., 66: 342-349, 2022）。

This year, quantitative PCR (qPCR) was used to determine the expression of Nox1 and related molecules (NoxA1, NoxO1, p22-phox) in cultured colorectal cancer cells. To investigate the role of JCRB cells in the development of colorectal cancer, DLD-1 cells were used to investigate the role of JCRB cells in the development of colorectal cancer. In addition, the expression of Nox1 and its related molecules (NoxA1, NoxO1, p22-phox) was quantified after treatment with differentiation inducers (RDA, active-type RDA, and RDA) in DLD-1 cells. As a result, the amount of NOX1 in the sample increased by about 2 times. The results of this study were as follows: 1. The construction of a system for the evaluation of gene expression of Nox1 and related molecules (NoxA1, NoxO1, p22-phox) was completed. In addition, DLD-1 cells were seeded with NOX1 and related molecules (NoxA1, NoxO1, p22-phox) during acid treatment, and the expression of NOX1 and related molecules (NoxA1, NoxO1, p22-phox) was modulated. In the coming year, the number of types of products will increase, and the number of products will increase. The analysis of the effect of Nox2 on the production of active acid in leukocytes and the analysis of the effect of Nox2 on the production of active acid in leukocytes (Kikuchi H. et al., Microbiol. Immunol., 66: 342-349, 2022）。

项目成果

Bifunctional activity of tangeretin (5,6,7,8,4'-pentamethoxyflavone) in suppression of cell growth and gene expression of the superoxide-generating system-related proteins in U937 cells

橘子素的双功能活性（5,6,7,8,4

• DOI: 10.2131/fts.9.151
• 发表时间: 2022
• 期刊: Fundamental Toxicological Sciences
• 作者: Hidehiko Kikuchi;Kaori Harata;Sumiko Akiyoshi;Takefumi Sagara;Harishkumar Madhyastha;Hitomi Mimuro;Futoshi Kuribayashi
• 通讯作者: Futoshi Kuribayashi

KIKUCHI LAB.

菊池实验室。

Pheophorbide-a acts as a photodynamic DNA-damaging reagent that causes remarkable increase in 8-hydroxydeoxyguanosine in cellular DNA

脱镁叶绿酸-a 充当光动力 DNA 损伤剂，导致细胞 DNA 中 8-羟基脱氧鸟苷显着增加

• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Association of Food Science Education in Japan
• 作者: Inuo Chisato;Okazaki Fumiko;Shiraki Rie;Tanaka Yutaka;Momma Keiko;Kondo Yasuto;Narita Hiroshi;Mori Satomi，Kurihara Kazuyuki，Inuo Chisato;廣田 恵璃，塚原 歩，藤田 真弓，津曲 俊太郎，高増 哲也，犬尾 千聡;犬尾 千聡;松本 由里香，塚原 歩，藤田 真弓，津曲 俊太郎，高増 哲也，犬尾 千聡;村上 純子，津曲 俊太郎，藤田 真弓，塚原 歩，高増 哲也，犬尾 千聡;塚原 歩，藤田 真弓，津曲 俊太郎，岡本 義久，高増 哲也，犬尾 千聡;塚原 歩，藤田 真弓，津曲 俊太郎，松本 由里香，高増 哲也，犬尾 千聡;藤田 真弓，松本 由里香，高増 哲也，犬尾 千聡;藤田 真弓，塚原 歩，津曲 俊太郎，松本 由里香，高増 哲也，犬尾 千聡;Hidehiko Kikuchi
• 通讯作者: Hidehiko Kikuchi

ウロリチンＡはgp91-phox遺伝子発現を増強することにより、U937細胞のレチノイン酸誘導性活性酸素産生能を亢進する

Urolithin A 通过增强 gp91-phox 基因表达来增强视黄酸诱导的 U937 细胞活性氧产生能力。

• 发表时间: 2022
• 作者: 菊池秀彦;原田香;栗林太
• 通讯作者: 栗林太