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Study on naturally-occurring peptides potentiating amphotericin B activity

天然存在的肽增强两性霉素 B 活性的研究

基本信息

批准号：
22K05333
负责人：
長井賢一郎
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

ネクトリアチドは微生物資源より見出されたアムホテリシンB（AmB）の抗真菌活性を増強する新規環状ペプチドである。ネクトリアチドは単独では抗真菌活性を示さないため、その併用はAmBの抗真菌活性を維持したまま、投与量を削減し、その結果として副作用を減弱すると期待されている。研究代表者はすでに確立した液相合成を活用して誘導体を合成した。その中でC末、N末、チロシンの残基を保護した鎖状誘導体が1.0 μg/mLの濃度でAmBのMIC値を1.0 μg/mLから0.063 μg/mLまで低下させAmB活性を16倍増強し、ネクトリアチドより高活性を示すことを見出した。この鎖状誘導体をリード化合物に取り上げて、プローブ分子としてビオチン体の合成を検討した。N末の保護基を選択的に除去する方法を見出し、続いてN末にNヒドロキシスクシイミドPEGビオチンを利用して、N末にビオチンを導入したプローブ分子を合成した。CLSI M27-A3法およびM-38-A2法に準じて、微量液体希釈法により酵母Candida albicans ATCC90029株に対するMICを測定し、またAMPB活性増強作用についてはAmBと化合物を併用した時の真菌に対するMIC値を測定した。プローブ分子は鎖状誘導体より低活性であったが、ネクトリアチドと同程度の活性を示した。続いて、AmBはエルゴステロールに結合することから、ネクトリアチドも脂質分子と相互作用するのではと仮定し、合成したプローブ分子を用いて脂質結合アッセイを行なった。ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノール、ホスファチジルイノシトール、エルゴステロール、コレステロールを評価した。その結果、ネクトリアチドはエルゴステロールと強い親和結合性を示した。

A new method for increasing antifungal activity of the microorganism is proposed. The antifungal activity of AmB alone is expected to be maintained, the dosage reduced, and the side effects reduced. Research representatives have established the use of liquid phase synthesis. In the middle of the chain, the residues of C, N and C were protected. The concentration of lock-like inducer was 1.0 μg/mL. The MIC value of AmB was 1.0 μg/mL. The activity of AmB was 16-fold higher. The activity of AmB was higher. The synthesis of these lock-inducing compounds is discussed in detail. A method for the selective removal of N terminal protective groups is described. CLSI M27-A3 method and M-38-A2 method were used to determine MIC values for Candida albicans ATCC90029 strain and to determine MIC values for fungi when AmB compounds were used in combination. The molecular lock-in inducer has low activity, and the molecular lock-in inducer has the same activity. In addition, AmB can also be used for lipid binding.ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノール、ホスファチジルイノシトール、エルゴステロール、コレステロールを评価した。As a result of this, the affinity between the two groups was demonstrated.