生育速度の差に着目した微生物の単離・培養方法

关注生长速度差异的微生物分离培养方法

• 批准号: 22K05409
• 负责人: 牟田 滋
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05409/
• 关键词: 難培養微生物; エマルションドロップレット; セルラーゼ; 蛍光基質

本研究の目的は、未だに単離・培養ができない微生物の獲得に、各微生物が示す生育速度の差を利用した「時間軸」の考えが利用できることの実証である。今回培養に用いる方法は、培地で作製したエマルションドロップレットに微生物を１細胞／液滴で隔離し、培養するエマルションドロップレット培養法であり１回のスクリーニングで数百万の微生物を隔離可能なミリオンスクリーニング方法である。これまでにエマルションドロップレット培養法では培養開始とともに増殖してその後減少する微生物群と、遅れて増殖を開始する微生物群が存在すること、すなわち微生物のスクリーニングに「時間軸」の考えを導入できることが示されている。R4年度はスクリーニングの対象をセルラーゼ生産菌とし、放線菌Streptomyces lividansをモデルとしてエマルションドロップレット培養法がセルラーゼ生産菌のスクリーニングに使用できることの確認を行った。具体的には、S. lividansを蛍光基質fluorescein-di-β cellobiosideを加えて、炭素源の異なる培地で作製したエマルションドロップレットで培養して、その蛍光強度の差によって、セルソーターを用いて選別できるかを検討し、選別可能であると判断した。並行して、土壌を分離源として液体培地に懸濁し、微生物を分散させた後に静置して土壌粒子を沈降させ、上澄みからメッシュで植物残渣等を除いたもの微生物懸濁液として、蛍光基質を加えてエマルションドロップレットを作製したところ、蛍光顕微鏡下で蛍光強度が異なる多数のドロップレットを確認できた。以上のことから、微生物の生育速度の差に着目したセルラーゼ生産菌のスクリーニングに蛍光基質を用いたエマルションドロップレット培養法が利用できることを明らかにした。

The purpose of this study is to test the growth rate of microorganisms in the culture of microorganisms, and to test the use of microbes to detect the growth rate of bacteria. This time, the microbes were quarantined by the method, the microorganisms were quarantined, the droplets were quarantined, and the microorganisms were quarantined in the millions of microbes. There is a significant increase in the number of microorganisms at the beginning of the culture, the presence of microflora in the microflora at the beginning of the culture, and the presence of microflora in the microflora at the beginning of the culture. the results show that there is a significant increase in the number of microorganisms. In the year R4, Streptomyces lividans bacteria were isolated from bacteria, and bacteria were isolated from bacteria. The bacteria were isolated from bacteria, and the bacteria were isolated from bacteria. The specific light-based fluorescein-di- β cellobioside, the carbon source, the light intensity, the temperature, the In the meantime, the soil is divided into different sources, the liquid is used to cultivate the ground, the microorganism is dispersed, the soil particles are settled, the soil particles are settled, and the plant residue is removed. Under the light micrometer, most of the light intensity will confirm the light intensity. The growth rate of microorganisms is different from that of other microbes, and the growth rate of microorganisms is not as good as that of microorganisms.

项目成果

エマルションドロップレットを用いた抗生物質生産菌の探索

使用乳液液滴寻找产生抗生素的细菌

• 发表时间: 2022
• 作者: 宮部大地;川本智也;河原弘樹;牟田滋;田代康介
• 通讯作者: 田代康介