The effects of antibiotics to the transfer frequency of the antibiotic resistance genes and the evolution of high-level resistance.

抗生素对抗生素抗性基因转移频率和高水平抗性进化的影响。

基本信息

批准号：
22K05790
负责人：
野中里佐
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Shokei University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

薬剤耐性菌の出現は世界的な問題であり、耐性菌拡大には細菌間の耐性遺伝子のやりとりが重要な役割を果たしていると考えられている。また養殖環境中の耐性菌が未知の遺伝子伝達機構を利用していると考えられたため、我々は養殖場由来の多剤耐性ビブリオ属菌から大腸菌へ薬剤耐性遺伝子が伝達し染色体へ組み込まれる現象について研究を行い、既知のトランスポゾングループには分類できない新規の可動性遺伝因子を明らかにしSEと命名した。これまでに2種類のSEが養殖場由来多剤耐性菌から見つかっていること、およびSEのはたらきにより伝達された多剤耐性プラスミドが受容菌染色体上へ取り込まれることが明らかとなった。これらの結果はSEが養殖場における耐性遺伝子の伝播を介して耐性菌拡大に重要な役割を果たしていることを示唆している。本研究では環境中のどのような要因がSEの転移頻度を促進したり抑制したりするのかを明らかにすることを目的として、SEの切り出し・転移頻度評価系の構築を試みた。SEは宿主染色体から切り出されていったん伝達性プラスミドへ組み込まれプラスミド伝達により別の細菌へ移動する。そのためSEをcaptureするためのSEフリーのプラスミドの導入を行った。さらに得られたプラスミド導入株から大腸菌への接合伝達を行い、SEが導入プラスミド上へ転移しさらにレシピエントへ伝達されるかについて検証した。その結果、SEのマーカーであるアンピシリン耐性を獲得した大腸菌が得られ、導入プラスミドの伝達も確認されたがベーターラクタマーゼ遺伝子は伝達していないことが示唆された。したがって今回用いたプラスミドの大腸菌への導入は何らかの理由によりアンピシリン耐性を付与してしまうことからSE転移検出系の構築には不向きであり、別のプラスミドや方法を検討する必要があることが明らかになった。

耐药细菌的出现是一个全球问题，据信，细菌之间的抗性基因的交换在耐药细菌的扩张中起着重要作用。此外，有人认为，水产养殖环境中的抗性细菌利用了未知的基因转移机制，因此我们研究了从耐多种的弧菌属中传播耐药性基因从水产养殖场传播的耐药性基因的现象，从水产养殖场到E. coli到E. coli，并将其纳入了众所周知的传播，并将其纳入了新颖的流动范围，并将其分类为移动属性，从而使他们分类为移动属性。已经揭示了在农场的多药耐药细菌中发现了两种类型的SE，并且通过SE功能传播的多药抗质粒掺入了受体染色体上。这些结果表明，通过在水产养殖农场中抗性基因的传播，SE在抗性细菌扩展中起着重要作用。在这项研究中，我们试图建立一个用于评估SE切除和转移频率评估的系统，目的是阐明环境中哪些因素促进或抑制SE转移频率。从宿主染色体切除SE并整合到可透射的质粒中，并通过质粒传递转移到另一种细菌中。因此，引入了无链质粒以捕获SE。此外，将获得的质粒 - 引入菌株偶联到大肠杆菌，将SE转移到质粒上，并进一步转移到受体中。结果，获得了SE的标志物，并确认了引入的质粒的传播，这表明β腹肌基因尚未传播。因此，由于某种原因，这次的引入质粒将质粒引入大肠杆菌赋予了氨苄西林的耐药性，因此它不适合构建SE转移的检测系统，并且已经发现有必要考虑其他质粒和方法。