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Characterization of cortical thymic epithelial cells in weak calf syndrome

弱小牛综合征皮质胸腺上皮细胞的特征

基本信息

批准号：
22K05988
负责人：
脇谷晶一
金额：
$ 2.75万
依托单位：
University of Miyazaki
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

虚弱子牛症候群（WCS）胸腺における皮質上皮細胞の特性を明らかにするため、南九州地方（宮崎県と鹿児島県の一部）の農家で飼養されていたが廃用認定された黒毛和種子牛を本研究の調査対象とし、網羅的遺伝子発現解析と組織学的解析を実施した。調査牛の剖検時に胸腺を採取し、各種サイトケラチンに対する免疫組織化学を実施したところ、CK5は髄質上皮細胞と被膜下上皮細胞で強陽性、皮質上皮細胞で弱陽性を、CK8とCK18はハッサル小体を除く実質内のあらゆる胸腺上皮細胞で同様の染色性を、CK14は髄質上皮細胞に限局して陽性を示すことが明らかになった。一方、これらのサイトケラチン染色性の局在は胸腺の病理組織学的状態に依存せずに認められたことから、WCS胸腺では胸腺上皮の皮髄の分画が保たれていることが示唆された。調査牛の胸腺と骨髄におけるCleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-1の陽性細胞率を調査したところ、胸腺の病態進行に伴ってCleaved Caspase-3とCleaved Caspase-1の陽性細胞率が上昇することが明らかになり、WCS胸腺の病態形成にはプログラム細胞死が関与していることが示唆された。一方、骨髄における陽性細胞率と胸腺の病態との関連は認められなかった。調査牛の胸腺を用いてDNAマイクロアレイ解析を実施したところ、胸腺の病理組織学的状態に従って、特に細胞周期関連遺伝子の発現量が変動することが明らかになった。これは我々がWCS胸腺で細胞増殖不全が起こっていることを明らかにした以前の免疫組織化学の結果と一致している。既知の胸腺皮質上皮由来機能分子に注目したところ、胸腺細胞の増殖を支持する因子（DLL4、IL-7）に胸腺の病態と関連した変動は認められなかったが、T細胞の選択に関わる特定の遺伝子の発現が病態進行に伴って低下する可能性が疑われた。

The characteristics of cortical epithelial cells in the thymus gland of weak calf syndrome (WCS) were clearly identified in the farmhouse of Minami-Kyushu Prefecture (a part of Miyazaki Prefecture). Histological analysis of the findings of black hair and seed cattle was carried out. Immunohistochemistry was performed on thymic tissue samples taken from cattle and various types of thymic tissue. CK5 was strongly positive for thymic epithelial cells and subcapsular epithelial cells, CK8 was weakly positive for cortical epithelial cells, CK18 was positive for thymic epithelial cells and CK14 was positive for thymic epithelial cells. The pathological changes of thymus gland depend on the pathological changes of thymus gland. The percentage of Cleaved Caspase-3 and Cleaved Caspase-1 positive cells in the thymus gland of cattle was investigated. The percentage of Cleaved Caspase-3 and Cleaved Caspase-1 positive cells in the thymus gland of cattle was increased during the pathological development of the thymus gland. The positive rate of thymic cells in a single prescription and bone marrow was higher than that in a single prescription. To investigate the changes in the expression of specific cell cycle-related genes in the thymus gland of cattle during DNA analysis and histopathological status. The results of immunohistochemistry were consistent with those of WCS. It is known that the thymic cortex is derived from functional molecules, thymocyte proliferation support factors (DLL4, IL-7), thymic pathology, recognition, T cell selection, and the possibility of specific thymocyte development associated with low levels of disease.