マウス卵巣体外培養モデルを用いた卵母細胞選抜機構の解明

使用小鼠卵巢体外培养模型阐明卵母细胞选择机制

• 批准号: 22K06041
• 负责人: 諸白 家奈子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06041/
• 关键词: 卵母細胞; 体外培養

哺乳類の卵巣内には数千～数万個の卵母細胞が存在するが、排卵まで生き残る卵母細胞と死滅する卵母細胞はどのようにして選抜されるのか、そのメカニズムは明らかになっていない。この卵母細胞の選抜メカニズムの解明は卵母細胞形成の理解またヒトや家畜における生殖補助技術への応用に期待されている。胎子期から出生前後の卵巣において、卵母細胞同士は細胞間架橋を形成し数珠つなぎ状に結合した卵母細胞シストとして存在し、その後、シスト内の卵母細胞の一部が死滅し細胞間架橋が切断されるシスト崩壊を経て、個々の卵母細胞が形成される。最近、シスト崩壊時に死滅する運命の卵母細胞から生き残る卵母細胞に細胞内小器官が移動する可能性がマウスにおいて示された（Lei et al., Science, 2016）。しかしながら、生体内卵母細胞の細胞内小器官を経時的に観察する技術は確立されておらず、実際に細胞内小器官が卵母細胞間を移動するのか、また、細胞内小器官の移動が卵母細胞の選抜に関与するのかは不明である。そこで本研究では、我々がこれまでに開発した体外卵巣培養系を生体内の現象を体外で解析するライブセルイメージング技術に応用し、卵母細胞選抜メカニズムを解明することを目的とした。令和4年度はシストおよび卵母細胞内小器官の動態を免疫化学的手法により解析し、卵母細胞シスト不完全崩壊モデルの評価を行った。その結果、卵母細胞シスト不完全崩壊モデルではシストを出生後6日に相当する時期まで長期間維持することが明らかになった。よって、シスト不完全崩壊モデルを用いることでシスト内卵母細胞間における細胞内小器官の移動を体外で観察することが可能と考えられる。

In mammals, thousands to tens of thousands of oocytes exist in an egg, ovulate, reproduce, and die. Oocytes are selected and destroyed. The study of oocyte selection and development in China is expected to shed light on the understanding of oocyte formation and the application of reproductive assistance techniques in livestock. During the fetal period, the oocyte and the cell-to-cell bridge are formed before and after birth, and the oocyte is formed in a number of ways. Recently, it has been shown that the possibility of small intracellular organ migration in the oocyte during the death of the oocyte has been reduced (Lei et al., Science, 2016）。The technique for detecting the intracellular small organ movement of oocytes in vivo is well established, and the technique for detecting the intracellular small organ movement of oocytes in vivo is unclear. The purpose of this study is to develop and analyze in vitro phenomena in oocyte culture systems and to elucidate the application of oocyte selection techniques. In order to analyze the dynamics of small organs in oocytes and evaluate the incomplete collapse of oocytes, immunochemical methods were used in the analysis of oocytes and oocytes in 4 years. The result is that the oocyte does not completely collapse, and the oocyte does not completely collapse until the sixth day after birth. In vitro observation of the movement of intracellular small organs between oocytes and oocytes is possible.