国内で新たに確認されたメダカの微胞子虫病の病害性に関する研究

日本新确诊青鳉微孢子虫病毒力研究

• 批准号: 22K06002
• 负责人: 柳田 哲矢
• 金额: $ 1万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06002/
• 关键词: 微胞子虫; メダカ; 寄生虫; 観賞魚; 実験動物

本研究では、申請者らにより国内で初めてメダカから確認された微胞子虫Pleistophora hyphessobryconisについて、1）メダカへの病害性、2）その他の観賞魚（コイ、キンギョなど）への病原性の有無と病害性、3）国内のメダカにおける本微胞子虫の蔓延状況を明らかにすることを目的としている。これまでの調査により、新たに4例のメダカにおける感染を確認した。これらはいずれも由来が異なり、1例は実験動物として飼育されていた個体、2例は観賞魚として生産された個体、1例は野生個体であり、本微胞子虫が国内に広く蔓延している可能性が示された。このうち2例についてリボソームDNAの一部塩基配列を決定した結果、いずれも国内初症例のものと100％一致した。この結果は、本微胞子虫が単一の起源から急速に拡散していることを示唆している。そこで、本微胞子虫の蔓延状況を確認するため、特異的なPCR法の開発を試みた。リボソームDNAの配列をターゲットとしたプライマーを作成し、胞子1個まで検出できる感度の高いPCR検査法を確立した。メダカへの病害性を明らかにするため、感染実験を実施した。感染メダカから得た胞子の懸濁液に未感染の成魚あるいは稚魚を浸漬した。その結果、成魚では感染率は低く、稚魚でより感染率が高いという結果が得られた。また、コイ稚魚に対して胞子懸濁液を筋肉注射した結果、コイの筋肉内でも微胞子虫が増殖し、胞子形成を行うことが示された。以上の結果から、本微胞子虫がメダカならびにコイへ与える影響について検証する実験手法を確立できた。

This study is aimed at: 1) identifying the pathogenicity of Pleistophora hyphessobryconis in China; 2) identifying the pathogenicity and pathogenicity of other fish species; 3) identifying the spread of Pleistophora hyphessobryconis in China. The investigation was conducted in 4 cases and the infection was confirmed. One case was found to be an animal breeding, two cases were found to be a fish breeding, one case was found to be a wild individual, and one case was found to be a microspore spreading in China. The results of the two cases were 100% consistent with those of the initial cases in China. As a result, the microspore has a single origin and a rapid dispersal. To confirm the spread status of microspores, develop a specific PCR method. The sequence of DNA in the genome was determined by PCR. The disease is very serious. Infected, uninfected adult fish. The infection rate of adult fish is lower than that of juvenile fish. The results of the injection of the muscle suspension of the fish, the propagation of the microspore in the muscle, and the formation of the spore are shown. The above results show that the microspore has been established by the method of detection and influence.