Development of a predictive mouse model for drug efficacy of IgG antibody therapeutics targeting cancer cells

开发针对癌细胞的 IgG 抗体疗法的药效预测小鼠模型

基本信息

批准号：
22K06068
负责人：
濱道修生
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本申請課題の最終目的は「免疫不全[Foxn1 knock-out (KO)]/ヒトFcガンマ受容体(FcgR)マウス」の作製であり、「ヒトIgG抗体医薬品の薬物動態をヒト化」することである。この目的を達成するため、我々は既に系統化された複数のFoxn1 KOマウス（+内在抗体遺伝子破壊系統）の免疫学的解析とヒト腫瘍形成の確認を実施する。ゲノム編集技術を用いて、Foxn1 KOマウスのFcgR遺伝子群をKOする。申請者の所属研究室が独自に開発を進めたマウス人工染色体ベクター(MAC)を用いて、ヒトFcgR遺伝子群とその制御領域をMACに搭載し、MAC-hFcgRを作製する。このMAC-hFcgRをFoxn1 + FcgR double knock-out (dKO)マウスのES細胞に導入し、本モデルマウスを作製する予定である。本研究課題は、更なる開発が進むヒトIgG抗体医薬品の薬物動態に着目し、薬効予測や安全性予測の外挿性の向上を目指した挑戦的な試みである。そこで令和4年度は、まず系統化された複数のFoxn1 KOマウス（+内在抗体遺伝子破壊系統）の免疫細胞を解析した。異なる系統による差異が確認され、本研究課題の目的の一つであるヒト腫瘍形成のためには、T細胞の減少が肝要と考えた。そこで、極めて明瞭なT細胞減少を示した系統を選択し、ヒトがん細胞を皮下移植した結果、腫瘍形成が認められた。また、この系統の更なる免疫学的解析を実施し、末梢血、胸腺並びに脾臓のミエロイド系免疫細胞やリンフォイド系免疫細胞の陽性率を確認した。さらに、マウスFcgRの遺伝子欠損やMACに搭載するヒトFcgR遺伝子群の計画も進めている。

该应用的最终目标是创建“免疫缺陷[FOXN1敲除（KO）]/人FC伽马受体（FCGR）小鼠”，并“人性化人IgG抗体药物的药代动力学”。为了实现这一目标，我们对多个已经系统化的FOXN1 KO小鼠（+内源性抗体基因破坏谱系）进行了免疫学分析和确认人类肿瘤发生。基因组编辑技术用于FOXN1 KO小鼠的KO FCGR基因。使用小鼠人工染色体矢量（MAC），由申请人实验室独立开发，将人FCGR基因组及其调节区安装在MAC上以生成MAC-HFCGR。该MAC-HFCGR将被引入FOXN1 + FCGR双基因敲除（DKO）小鼠的ES细胞中，以生成该模型鼠标。该研究主题是提高药物疗效和安全性预测的外推，重点是人类IgG抗体药物的药代动力学，这是一个挑战性的尝试，这些药物正在进一步开发中。因此，在2022年，我们首先分析了来自多个紧张的FOXN1 KO小鼠（+内源性抗体基因破坏菌株）的免疫细胞。确认了不同菌株之间的差异，我们认为T细胞的减少对于人类肿瘤发生是必不可少的，这是本研究主题的目的之一。因此，选择了一条非常清晰的T细胞还原的线，并皮下移植人类癌细胞，从而导致肿瘤形成。还对该菌株进行了进一步的免疫学分析，以确认外周血，胸腺和脾脏中髓样和淋巴样细胞的阳性速率。此外，我们还致力于计划小鼠FCGR中的基因缺乏，并将一组将安装在Mac中的人类FCGR基因。