軟骨細胞の時空間的な極性形成を規定する分子基盤の解明

点击翻译按钮获取中文摘要

私共は、培養細胞/ショウジョウバエを用いた研究により、極性化シグナルと細胞骨格の動態制御をリンクさせる新たな役者として微小管－Wnt/PCPネットワークを発見した（EMBO Rep., 2018; Life Sci. Alliance, 2022.）。その知見からマウスを用いた解析を開始し、その制御分子のひとつである微小管結合タンパク質：Map7とそのパラログ：Map7D1がいくつかの細胞種の極性化に関与する可能性を見出しており、その詳細な分子メカニズムを明らかにすべく、研究を進めている。本研究では、元自治医大・鈴木博士らが作製した、C末端側を欠失したMap7D1を発現するMap7d1変異マウスの解析から端を発し、Map7D1が内軟骨性骨化に関与する可能性を見出した。また、Map7d1-egfpノックインマウスを用いた解析により、Map7D1の発現が前肥大化軟骨細胞層でピークに達し、細胞内局在のパターンが変化する事を見出した。上記の知見から、Map7D1が軟骨細胞の極性化を制御して内軟骨性骨化に関与すると想定し、他の組織との連関を排除して軟骨細胞の極性化に特化して解析すべく、軟骨細胞特異的にノックアウト（KO）が可能となるCol11a2-CreER; Map7d1 floxマウスを樹立した。上記のマウス作製に先立ち、Map7d1 floxマウスと卵子特異的なCre発現マウスとの交配によって、Map7d1 floxアレルが設計通りに作動する事を確認し、それに付随してMap7d1 KOアレルの単離に成功した。私共は、Map7d1 KOマウスがMap7d1変異マウスよりも重篤な表現型を示す可能性を見出しており、現在、軟骨細胞特異的KOによる解析を進めている。