Studies on the biological function of the ovarian peptide CiDR1

点击翻译按钮获取中文摘要

本研究では、カタユウレイボヤの卵巣から新規に同定したペプチドホルモンCiDR1について、受容体遺伝子を同定し、卵胞成長における機能を明らかにする事を目的としている。2022年度は研究計画に従い、機械学習による受容体予測によって得られた15の受容体候補遺伝子について、細胞内Ca2+放出を促すG16alphaとの融合タンパクとしてSf9細胞に発現させ、ペプチドとの反応性を細胞内Ca2+放出として検証した。多検体自動蛍光測定装置FlexStationや、かん流装置と共焦点レーザー顕微鏡を用いてリガンド処理による細胞内カルシウムイオンの放出をタイムラプスで観察したが、CiDR1との有意な相互作用を検出することはできなかった。一方で、CiDR1の機能解析については、計画に先行してin situ hybridizationによる卵巣内局在解析を行い、Stage II卵胞のテスト細胞特異的に発現していることを明らかにした。また、in vivoの機能解析についてはCiDR1に特異的なCRISPR RNAを設計し、ゲノム編集体の作製に着手した。