Development of sensitive intracellular molecular analytical method by single-cell organelle injection and derivatization

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細胞内のオルガネラに局在する分子のみを選択的かつ高感度に分析するために、ターゲットとしたオルガネラ内で誘導体化を行う「オルガネラ内誘導体化法」と、誘導体化された分子を質量分析で選択的に検出する「オルガネラ誘導体化分子の高感度質量分析法」を組み合わせた新規分析法を開発し、オルガネラメタボロミクスの実現を目指す。２０２２年度は分析対象とするオルガネラを可視化するために、各オルガネラを蛍光染色する試薬の検討を行った。これにより、分析対象とする細胞内のオルガネラを蛍光顕微鏡観察により判別することができるようになる。オルガネラ内の微量成分を質量分析するために、アミノ基やカルボキシ基を持つアミノ基や有機酸に対して誘導体化を行い、イオン化効率の向上を目指したところ、有機酸で数十倍の感度向上を達成した。現在、誘導体化条件などの検討を行っている。細胞内オルガネラインジェクションについては、低侵襲細胞インジェクションシステムのセットアップが完了したので、２０２３年度からは実際に細胞へのインジェクション条件の検討を行う予定である。これらの研究で得られた知見について、学会発表および論文発表を行った。