質量分析による環境中ラン藻類迅速同定・分類法の開発

环境中蓝藻质谱快速鉴定与分类方法的建立

• 批准号: 22K06568
• 负责人: 今西 進
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Meijo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06568/
• 关键词: ラン藻; 分類・同定; 質量分析; MALDI; DART

質量分析を用いたラン藻類の迅速分類・同定法の開発に取り組んだ。これまでmatrix assisted laser desorption/ionization-time of flight（MALDI-TOF）型質量分析計を用いて病原性微生物等の迅速同定を行うことができるMALDI Biotyperに着目し、ラン藻類の分類に応用するため、培養した単離ラン藻株を用いて測定条件の検討を行ってきた。しかし、池や湖から採取した野生のラン藻はサンプル水中に様々な物質を含んでいることが多く、MALDI Biotyperによる自動測定で得られたマススペクトル上では十分なシグナルノイズ比（S/N）のイオンピークを検出することが困難であり、手動でレーザーパワーを増強させる必要があった。そこで高いレーザーパワーによる自動測定を行えるよう条件検討を行い、野生ラン藻の迅速測定を可能にした。野生ラン藻は愛知県内の池から採取した。ラン藻類の分類・同定に必要なスペクトルライブラリを作成するため、研究室内で培養している単離ラン藻株に加え、さらに単離ラン藻株を追加購入し、検討した測定条件を用いてスペクトルを取得・収集している。また、より簡易かつ迅速な質量分析を可能にするアンビエントイオン化法の1種であるdirect analysis in real time（DART）イオン化に着目し、ラン藻類の分類・同定への応用を試みている。予備検討において、クラスタリングにより低分子有機化合物のマススペクトルを区別する解析法を構築したため、これを培養ラン藻株から抽出した揮発性有機化合物のDART質量分析に応用し、抽出時に培地成分の混入を抑えることにより、少数ではあるがラン藻株を区別することができた。さらに再現性を向上させるため、測定条件の検討を行っている。

Rapid classification and identification of algae by mass analysis This matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight (MALDI-TOF) type mass analyzer was used to rapidly identify pathogenic microorganisms. The MALDI Biotyper was used to investigate the conditions for the identification, culture and isolation of algae strains. In addition, MALDI Biotyper automatically determines the content of the substance in the wild algae. For example, if you want to use the software, you can use the software. Wild algae are taken from the pool in Aichi. Algae classification, identification, preparation, laboratory culture, isolation, additional purchase, evaluation, measurement conditions, acquisition and collection A direct analysis in real time (DART) method for the classification and identification of algae is proposed. The analysis method of low molecular weight organic compounds was established by using DART for quality analysis. Reproducibility is determined by measuring the conditions and performing the test.