新規生理活性脂質「セラミド１リン酸」の解析プローブの開発と病態研究への応用

新型生物活性脂质“神经酰胺1-磷酸”分析探针的研制及其在病理研究中的应用

• 批准号: 22K06624
• 负责人: 長谷川 顕子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06624/
• 关键词: 生理活性脂質; 脂質解析プローブ; ガン; セラミド1リン酸; 炎症

新規生理活性脂質セラミド1リン酸は、炎症反応・細胞増殖・ガンの増悪などへの関与の可能性が指摘されているが、生体内では極微量成分であり、代謝や局在の情報も少ないことなどから、その生理機能発現の分子機構はほとんど明らかになっていない。本研究では、セラミド1リン酸を特異的に検出できる解析プローブを開発し、それを用いてセラミド1リン酸の細胞内動態や共局在分子の解析などを行う。これにより、ガンの増悪や炎症反応などの病態におけるセラミド1リン酸の作用機序の解明を目指す。これまでの予備実験で、ある脂質代謝関連酵素がセラミド1リン酸特異的結合活性を持つこと、そのうちの一部領域（M1）が結合を担うことがわかっている。本年度は、蛍光タグを付加したM1リコンビナント蛋白質を作製し、様々な細胞株について細胞染色を行った。その結果、ほとんどの細胞株で細胞内にドット状の染色像が観察され、特にある膵臓腺ガン細胞株では多数のドット像が認められた。次に、各種オルガネラマーカーとの二重染色を行うことにより、これらのドット像の局在部位の同定を試みた。また、細胞をいろいろな薬剤処理するなどして、ドット像の数や分布に影響を与えるような刺激やシグナルの探索を行った。ドット像は、セラミド1リン酸を含む細胞内小胞を反映していると考えられ、ある刺激やシグナルによってその動態が制御されていると推測される。次年度以降、蛍光標識したM1を細胞内に発現させて、セラミド1リン酸を含む小胞の動態を生細胞で観察することにより、詳細な機構を明らかにできると考えており、その発現系の構築にも着手した。

The new regulation of physiologically active lipids is based on the following factors: acid, inflammation, cell proliferation, growth, molecular mechanism of physiological function development, molecular mechanism of metabolism, and molecular mechanism of biological function development. In this study, we investigated the development and molecular analysis of intracellular dynamics of nucleic acid in the context of its specific detection. This article describes the mechanism of action of the inflammatory reaction. The lipid metabolism-related enzymes have acid-specific binding activity, and a part of the domain (M1) has binding activity. This year, we have increased our efforts to produce M1 protein and cell lines. The results showed that most of the staining patterns in the cell lines were observed, especially in the glandular cell lines. All kinds of colors, colors. To explore the influence of the number distribution of the cells and the stimulation of the cells. The changes in the cellular structure of the cells are predicted by the changes in the cellular structure of the cells In the next year, we will start with the construction of the intracellular development system, including the observation of the dynamics of small cells and the detailed mechanism.