スフィンゴミエリンの細胞内輸送機講と細胞機能への関与の解析

鞘磷脂细胞内转运机制及其参与细胞功能的分析

• 批准号: 15790063
• 负责人: 長谷川 顕子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790063/
• 关键词: スフィンゴミエリン; ライセニン; 脂質輸送; 脂質ラフト; 上皮細胞; タイトジャンクション; 変異株; コレステロール

スフィンゴミエリンはコレステロールや糖脂質などとともに脂質ラフトと呼ばれるマイクロドメインを形成し、様々な細胞機能に関わっていると考えられている。本研究では、スフィンゴミエリンの細胞内輸送機構及びその機能を明らかにするために、スフィンゴミエリンに特異的に結合する毒素ライセニンを用いて研究を進めている。私はこれまでに、培養上皮細胞についてライセニン耐性変異株を樹立し、その性状解析を行ってきた。変異株ではスフィンゴミエリンの合成や含量には顕著な異常は認められないが、ライセニンやスフィンゴミエリナーゼに対する感受性が著しく低下していることから、スフィンゴミエリンの細胞内輸送機構あるいはスフィンゴミエリンを含む脂質ラフトの形成機構に異常があるものと推測される。ラジオアイソトープや蛍光分子で標識した脂質を用いてスフィンゴミエリンの形質膜への輸送やリサイクリングには明確な異常は見出せなかった。そこで変異株を糖脂質合成阻害剤で処理したところ、変異株の細胞表面にライセニンが結合できるようになった。また変異株は親株に比べて酸性糖脂質が有意に増加していた。これまでの研究結果から、膜中に糖脂質が共存すると脂質ラフトにおけるスフィンゴミエリンの分布状態が変化してライセニンの結合量が変化することがわかっている。ライセニン耐性株では、糖脂質組成が異常なために脂質ラフトにおけるスフィンゴミエリンの存在状態が変化しているものと考えられる。またライセニン耐性株ではタイトジャンクションに異常があることがこれまでにわかっている。脂質ラフトの重要な成分であるコレステロールについて、その合成や分布を変化させる薬剤で細胞を処理したところ、タイトジャンクション構築蛋白質の局在が変化した。これらの結果は、脂質ラフトが上皮細胞におけるタイトジャンクションの構築に関与している可能性を示唆している。

The cell function is related to the formation and development of glucose and lipid. This study is intended to further the study of the intracellular transport mechanism and the function of the toxin in the context of specific binding. In this study, we analyzed the characters of the resistant mutants in cultured epithelial cells. The sensitivity of the mutant to the synthesis of lipid is lower than that of the mutant. The light molecule is identified by the lipid molecule, and the transport molecule is identified by the lipid molecule. The cell surface of different plants was treated with inhibitors of carbohydrate and lipid synthesis. The acid sugar lipids of different plants are intentionally increased. The results of this study show that the distribution of carbohydrate and lipid in the membrane changes from blue to blue, and the binding amount of lipid changes from blue to blue. The sugar and lipid composition of the resistant strain is abnormal. The lipid composition is abnormal. The existence state of the resistant strain is changed. The resistance of the plant is different from that of the control plant. The important components of lipids are changing in their synthesis and distribution, and the cellular processes are changing in their composition and distribution. These results suggest that lipid metabolism may play an important role in the development of epithelial cells.

项目成果

Akiko Yamaji-Hasegawa et al.: "Oligomerization and pore formation of a sphingomyelin-specific toxin, lysenin"Journal of Biological Chemistry. 278. 22762-22770 (2003)

Akiko Yamaji-Hasekawa 等人：“鞘磷脂特异性毒素赖氨酸的寡聚化和孔形成”生物化学杂志。

Fungal metabolite sulfamisterin suppresses sphingolipid synthesis through inhibition of serine palmitoyltransferase.

• DOI: 10.1021/bi048605l
• 发表时间: 2005-01
• 期刊: Biochemistry
• 影响因子: 2.9
• 作者: A. Yamaji-Hasegawa;A. Takahashi;Y. Tetsuka;Yukiko Senoh;Toshihide Kobayashi

脂質ラフトの多様性

脂筏的多样性

• 发表时间: 2005
• 期刊: 実験医学(増刊) 23(印刷中)
• 作者: Akiko Yamaji-Hasegawa et al.;山路-長谷川顕子
• 通讯作者: 山路-長谷川顕子

Recognition of sphingomyelin by lysenin and lysenin-related proteins

• DOI: 10.1021/bi049561j
• 发表时间: 2004-08-03
• 期刊: BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 2.9
• 作者: Kiyokawa, E;Makino, A;Kobayashi, T
• 通讯作者: Kobayashi, T

Distribution and transport of cholesterol-rich membrane domains monitored by a membrane-impermeant fluorescent polyethylene glycol-derivatized cholesterol

• DOI: 10.1074/jbc.m313568200
• 发表时间: 2004-05-28
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Sato, SB;Ishii, K;Kobayashi, T
• 通讯作者: Kobayashi, T