細胞膜リン脂質リモデリングを標的とした新規抗がん剤の創出

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LPCAT1は生体膜リン脂質生合成における代表的なホスファチジルコリン生合成酵素である。LPCAT1は肺サーファクタント脂質生合成に重要な役割を担っていることが知られているが、近年になりがん細胞の増殖においても重要な役割を果たしていることが明らかになりつつある。本年度は放線菌、カビ、昆虫病原糸状菌などの微生物代謝産物およびケミカルライブラリーをスクリーニング源として、以下の2つの系でLPCAT1阻害剤のスクリーニングを行った。1次スクリーニングはLPCAT1により生成されるCoAのチオール基をチオール基と反応することで蛍光を発する7-diethylamino-3-(4′-maleimidylphenyl)-4-methylcoumarin (CPM)で検出した。この系は384-wellsプレートを使用した簡便なもので、ヒットしたものについては基質に16：0-d31リゾPCを用いて、LPCAT1により生成されるd31- DPPCをLC-MSで直接検出することによりLPCAT1活性を評価した。およそ5000種類の微生物代謝産物およびケミカルライブラリーから1次スクリーニングでは40のヒットが得られた。2次スクリーニングで阻害活性を確認できた微生物代謝産物について大量培養によりスケールアップを行ないLPCAT1阻害活性を指標に精製を行った。得られた化合物の構造決定をおこなった結果、tyrosine phosphatase inhibitorであるRK-682が得られた。残念ながら本化合物のLPCAT1に対するIC50値は100 μMと非常に高かったことから、本化合物については研究の継続を断念した。活性の認められた微生物培養液について順次培養および精製を行い、さらに強い阻害剤発見を目指す。