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Development of a rational screening method for highly efficient search for neurotrophic compounds

开发合理的筛选方法以高效搜索神经营养化合物

基本信息

批准号：
22K06689
负责人：
久保美和
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokushima Bunri University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

BSTと PC12 細胞に対する活性にどの程度の相関性があるのか再検討した。77種類ミャンマー産植物ライブラリーのうち、BSTに活性を示したのは20サンプル、活性がなかったものは57サンプルであった。活性を示した20サンプルのうち、16サンプルがPC12細胞にて活性が認められた。すなわち、BSTでピックアップできたサンプルの80％がPC12細胞に活性を示したことになる。一方、BSTに活性のなかった57サンプルのうち40サンプルでPC12細胞に活性が認められなかった。つまり、BST活性のなかったサンプルの約70%がPC12細胞に対して活性を示さないことがわかった。ブラインシュリンプの動きを追跡できるトラッキングシステムを構築し，その動きを数値化したハイスループットBST の確立を目指した。ブラインシュリンプはかなり小さいため，一般的な動画撮影用カメラでの撮影は難しい。様々なカメラのデモを試みたところ，ハイスピードカメラが最も良いことがわかった。シュリンプが入ったシャーレの真上にカメラを設置し，コントロール，ポジティブコントロールとしてBST活性を有することが分かっているバングレンを添加し，撮影，トラッキング解析を行った。コントロールとポジティブコントロールで明らかにシュリンプの動きに差が認められ，数値として表すことができた。ただし，シャーレ側面の影にシュリンプが入り込み，解析作業を複雑にすること，シュリンプの餌として加えているクロレラ等がシュリンプと誤認識されることがわかった。迅速な解析作業でなければHTSとして意味をなさないため，細かい微調整が必要となった。餌のタイミング，シャーレの種類，人工海水の容量など様々な検討を行った。その結果，シャーレを高輝度バックライト照明上に置き，真上から撮影することで解決することができた。

BST, PC12, cell activity, activity, sex, activity, sex, sex, activity, activity 77 species of plants are affected, the activity of BST shows that the temperature is 20 percent, and the activity is 57 percent. The activity shows that the activity is 20% and 16%, respectively, and that the PC12 cell is active. The activity of 80% PC12 cells shows that the activity of the cells is different from that of BST cells. On the one hand, the BST is active. 57. 57. 40. The PC12 cell is active. The activity of BST is different from that of other cells. The activity of PC12 cells is about 70%. Please tell me how to make sure that the BST is set up. I don't know how to make a movie. I don't know how to make a picture. I don't know what to do. I don't know. I don't know. I don't know.