Mechanistic study on cancer progression based on the comparison between antitumor effects and epithelial-mesenchymal transition by anticancer drugs

上皮間葉転換（EMT）は、上皮細胞が上皮の性質を失い、間葉系の性質を獲得する現象をいうが、近年EMTががんの悪性化と関連することが明らかになってきている。本研究では、抗がん剤によって主効果とは別に上皮間葉転換（EMT）が誘発されることが、がんの悪性化を促すとの仮説を検証し、EMTに特異的な防御標的を見出すことを目的としている。2022年度は抗がん効果が示された細胞とEMTが生じた細胞の分取法確立を目的として、膜タンパク質であるITGA2に着目した分取法の構築に取り組んだ。その結果、ITGA2が高発現している細胞群をFACSによって分取したところ、ITGA2低発現の細胞群と比べて、EMTの代表的なマーカーであるα-smooth muscle actinのmRNA発現が増加していたことから、ITGA2がEMTの細胞を分取する膜タンパク質マーカーとして有用である可能性が示唆された。さらに、ITGA2阻害剤によって、抗がん剤誘発性EMTが抑制されたことから、ITGA2自身がEMTの誘発に関与する可能性も明らかになった。一方、アポトーシスを検出するため、細胞外に露出されるホスファチジルセリンをFITC標識したAnnexin Vと反応させ、FITCの蛍光強度によって細胞を分取したが、両細胞においてEMTマーカー発現の差は認められなかったことから、抗がん剤によるアポトーシスはEMTマーカー発現変動には依存せずに誘発される可能性が明らかになった。

上皮間葉転換（EMT）は、上皮細胞が上皮の性質を失い、間葉系の性質を獲得する現象をいうが、近年EMTががんの悪性化と関連することが明らかになってきている。本研究では、抗がん剤によって主効果とは別に上皮間葉転換（EMT）が誘発されることが、がんの悪性化を促すとの仮説を検証し、EMTに特異的な防御標的を見出すことを目的としている。2022年度は抗がん効果が示された細胞とEMTが生じた細胞の分取法確立を目的として、膜タンパク質であるITGA2に着目した分取法の構築に取り組んだ。その結果、ITGA2が高発現している細胞群をFACSによって分取したところ、ITGA2低発現の細胞群と比べて、EMTの代表的なマーカーであるα-smooth muscle actinのmRNA発現が増加していたことから、ITGA2がEMTの細胞を分取する膜タンパク質マーカーとして有用である可能性が示唆された。さらに、ITGA2阻害剤によって、抗がん剤誘発性EMTが抑制されたことから、ITGA2自身がEMTの誘発に関与する可能性も明らかになった。一方、アポトーシスを検出するため、細胞外に露出されるホスファチジルセリンをFITC標識したAnnexin Vと反応させ、FITCの蛍光強度によって細胞を分取したが、両細胞においてEMTマーカー発現の差は認められなかったことから、抗がん剤によるアポトーシスはEMTマーカー発現変動には依存せずに誘発される可能性が明らかになった。