Crohn病の腸内細菌叢と局所サイトカインに基づく生物学的製剤の選択基準の確立

建立基于克罗恩病肠道微生物群和局部细胞因子的生物制剂选择标准

• 批准号: 22K06758
• 负责人: 半田 修
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kawasaki Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06758/
• 关键词: クローン病; 腸内細菌; 酪酸産生菌; 腸管局所サイトカイン; 生物学的製剤; 粘膜関連細菌叢; サイトカイン; バイオマーカー

原因不明難病であるCrohn病は、腸管粘膜の全層性炎症を生じ、著しく生活の質が低下するだけでなく、腸管狭窄合併症等により頻回の外科的手術を要する。そのため発症早期からの炎症のコントロールが非常に重要である。近年、新規の生物学的製剤が数種類登場したが、その選択基準が確立されていないことが問題となっている。本研究ではCrohn病において、生物学的製剤投与前の粘膜関連細菌叢(Mucosa- associated/adherent Bacteria, MAM)と腸管粘膜内のサイトカインを測定し、生物学的製剤 有効性のバイオマーカーを確立することを目的としている。内視鏡下にブラシで採取した回腸粘液はDNAを抽出後、16srRNA遺伝子のV3-4領域を増幅してIlumina社製Miseqによりシーケンス解析を実施した。QIIMEを用いて微生物の属レベルまでの同定を行い、細菌構成比、多様性について検討した。対象はCrohn病患者39例（F:M=14：25、平均年齢38.1歳）健常対照者23例（F:M=15：7平均年齢56.1歳）。Crohn病群は対照群と比較して菌の多様性はα、β共に有意に低下していた。Crohn病群内の比較では狭窄あり群ではCoprococcusが有意に低下しており、手術歴あり群ではDorea、Oscillospira、Coprococcusが有意に低下、Veillonellaが有意に増加していた。病型別の比較では小腸型＜小腸大腸型＜大腸型の順に有意にFaecalibacteriumが増加していた。この結果は第60回日本小腸学会学術集会で発表した。また、内容についてはRedox Report誌に投稿中である。今後、MAMと同時採取している小腸局所粘膜のサイトカイン測定を行い、生物学的製剤投与が有効であった群と無効であった群との群間比較を行い、効果予測に役立てたい。

Crohn's disease of unknown cause, full-thickness inflammation of intestinal mucosa, poor quality of life, complications of intestinal stenosis, etc. It is very important to develop inflammation in the early stage of the disease. In recent years, new regulations on biological systems have been introduced, and criteria for selection have been established. The purpose of this study was to determine the presence of Mucosa-associated/adherent Bacteria (MAM) in Crohn's disease and to establish the biological characteristics of MAM. After extraction of mucus DNA under endoscope, the V3-4 domain of 16srRNA gene was amplified and analyzed by Ilumina Corporation. QIIME is used to investigate the identity, composition and diversity of microorganisms. 39 patients with Crohn's disease (F:M=14:25, mean age: 38.1 years) and 23 healthy patients (F:M=15:7, mean age: 56.1 years). Crohn's disease group is relatively low in diversity and α and β are intentionally low in diversity. Crohn disease cluster is narrow, Coproccus is intentionally low, surgical cluster is intentionally low, Veillonella is intentionally high. Comparison of disease types: small intestine type <small intestine type <large intestine type, and intentionally Faecalibacterium increased gradually. The results of the 60th Japan Small Intestine Society Academic Conference were presented.また、内容についてはRedox Report志に投稿中である。In the future, MAM will simultaneously take the measurement of small intestine mucosa, biological control and comparison between groups, and predict the results.

项目成果

クローン病患者における粘膜関連細菌叢の解析

克罗恩病患者粘膜相关菌群分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 半田 修;大澤元保;松本正憲;松本啓志;井上 亮;内藤裕二;梅垣英次;塩谷昭子
• 通讯作者: 塩谷昭子