脳内に局在するOlig2由来アストロサイト亜集団の機能解析

大脑中 Olig2 衍生的星形胶质细胞亚群的功能分析

• 批准号: 22K06812
• 负责人: 辰巳 晃子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06812/
• 关键词: アストロサイト; Olig2; タモキシフェン; 三つ組シナプス; GAT-3; ディスキネジア

我々は成熟脳において転写因子Olig2系譜のアストロサイト(以下Olig2-AS)の亜集団を見出しこれらがGABA入力のある神経核に局在する傾向がある事を報告してきた。本研究では神経回路特異的という観点からOlig2-ASの機能解析を目指す。まず、Olig2-ASの発生を明らかにするために、タモキシフェン(TM)投与によりOlig2プロモーター下にtdTomatoを発現するダブルトランスジェニックマウスを作成し、TM投与する時期を ①P0-P7、②P8-P14、③P15-P21、④ P22-P28 に限定する４群に分けた。一般的にTM投与は腹腔内注射が用いられるが、仔マウスへの連日投与はストレスが高いことから侵襲性のない母乳経由で投与する方法を検討した。授乳する母親マウスにTMを0.005％～0.05％の濃度に混合した餌を与え、その母乳で育った仔マウスの脳における組換え率を検討したところ、P0～P14仔マウスは0.01％、P15~P28仔マウスへは0.05％のTM混合餌により効率よく組換えがおこることが分かった。それぞれの群でTM投与終了日の翌日に仔マウスの脳を取り出してtdTomato の免疫組織化学染色によりOlig2-ASの局在パターンを観察した。その結果、①②群 (P0~P14にTAM投与)ではOlig2-ASがマウス脳全体にユビキタスに存在した。一方③④群 (P15-P28にTAM投与)では、Olig2-ASは明確な局在性を示した。この分布は成熟脳にTMを投与した場合と同様の局在性であった。つまりP15以降は脳全体に散在していたOlig2-ASが生後２週間を境にある神経核のみに限局する事を示唆している。シナプス形成が終了し神経回路が完成するこの時期にOlig2-ASの局在性が完成する事が明らかになった。

We report on the tendency of GABA to enter into the nuclear system in the context of the maturity factor Olig2 genealogy and its distribution (Olig2-AS). The purpose of this study is to provide guidance for functional analysis of Olig2-AS at the point of neurocircuit specificity. The time period for the development of Olig2-AS is determined by four groups: ①P0-P7, ②P8-P14, ③P15-P21, ④ P22-P28. General administration and intraperitoneal injection of TM are discussed. 0.005%~0.05% of the concentration of the mother's milk, P0~P14, 0.01%~ 0.05% of the mixture of TM. The results of immunohistochemical staining for Olig2-AS were obtained on the day after the injection. As a result, ①② group (P0~P14) is the same as Olig2-AS group. A party ③④ group (P15-P28) TAM vote and, Olig2-AS clear in the presence of the show. The distribution of these two types of products is similar to that of the original products. P15 is the most important factor affecting the development of the brain during the first 2 weeks of life. The time period for the completion of the neural loop is Olig2-AS.

项目成果

Amino acid transporter Asc-1 (SLC7A10) expression is altered in basal ganglia in experimental Parkinsonism and L-dopa-induced dyskinesia model mice

• DOI: 10.1016/j.jchemneu.2022.102191
• 发表时间: 2022-11
• 期刊: Journal of Chemical Neuroanatomy
• 影响因子: 2.8
• 作者: Kazuki Nakahara;H. Okuda;A. Isonishi;Yoshie Kawabe;Tatsuhide Tanaka;K. Tatsumi;A. Wanaka