ゼブラフィッシュのプロテオーム解析による一次線毛動態制御因子の探索と機能解析

通过斑马鱼蛋白质组分析寻找初级纤毛动力学调节因子并进行功能分析

• 批准号: 22K06882
• 负责人: 白水 崇
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06882/
• 关键词: 一次線毛; ゼブラフィッシュ; プロテオミクス; プロテオーム解析

【研究目的】細胞膜上に存在する小さな不動性の突起である一次線毛(Primary cilia)は細胞内外のシグナル伝達に働き、その構造形成および機能に関する遺伝子の異常が線毛病と言われる一連の疾患を引き起こすことが知られている。また一次線毛を介したシグナル伝達が、細胞の増殖や停止に関わることが示唆されたことから、一次線毛の動態制御メカニズムの解明が、新たながん治療の標的に繋がることが期待されている。我々はこれまでに、一次線毛形成に関わる遺伝子としてトリコプレインを同定し、ユビキチン・プロテアソーム系を介した制御により、一次線毛の形成抑制に働くことを明らかにしてきた。しかしながら、ユビキチン・プロテアソームを介した一次線毛形成のメカニズムには未解明な点が多く、その全貌は明らかにされていない。そこで本研究では、プロテオーム解析によりこの経路の制御に関わるタンパク質を網羅的に同定し、ゼブラフィッシュを用いたin-vivo解析によりその機能を評価することにより、一次線毛の形成を制御する機構を解明することを目的とした。【令和４年度の成果】本年度はTCHPノックアウトゼブラフィッシュの組織を用いたプロテオーム解析を行った。DIA法によるショットガン定量プロテオーム解析を行ったところ、8000以上のタンパク質が同定され、約200個のタンパク質の発現変動が確認された。これら発現変動タンパク質のうちのいくつかは、ヒト培養細胞系でこれまでに解析された、一次線毛形成制御シグナル(TCHP-AurAキナーゼカスケード)の関連分子と相互作用することが、ネットワーク解析により示唆された。今後は、これらの候補分子の中から、新たな一次線毛形成にかかわる分子を同定し、その機能を調べていく予定である。

[Objective] The presence of small immobile projections on cell membranes, Primary cilia, and abnormal lineages of genetic material related to the formation and function of structures inside and outside the cell, are responsible for the initiation of a series of diseases. The first line of hair, the second line of hair, the third line of hair, the fourth line of hair, the fourth line of The first thread formation is related to the first thread formation. The second thread formation is related to the first thread formation. The first line of hair is formed in the middle of the film. The first line of hair is formed in the middle of the film. The purpose of this study is to analyze the relationship between the control of the circuit and the quality of the circuit, and to evaluate the function of the circuit. This year's TCHP will be launched in the future. DIA method for quantitative analysis of more than 8000 samples was established, and about 200 samples were identified. The analysis of molecular interactions associated with the development of TCHP-AurA in cultured cell lines and primary hair-forming control systems. In the future, the candidate molecules will be selected, and new ones will be formed. The molecules will be determined and the functions will be adjusted.

项目成果

An investigation of the role of primary cilia in the repairing process after brain injury

初级纤毛在脑损伤修复过程中作用的研究

• 发表时间: 2022
• 作者: Takashi Shiromizu;Ryohei Shibata;Daishi Yamakawa;Masaki Inagaki and Yuhei Nishimura
• 通讯作者: Masaki Inagaki and Yuhei Nishimura