Therapeutic strategy against infectious and inflammatory diseases by targeting master regulators of mast cells and eosinophils

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マスト細胞株であるBRC6細胞を用いGATA2抗体によるクロマチン免疫沈降後の次世代シーケンス解析を行い、転写因子GATA2のゲノムDNA上での結合部位を網羅的に探索した。その結果、代表的な炎症性サイトカインであるIL6遺伝子の5'上流-39kbに位置する制御領域内に、GATA2結合ピークが複数存在することがわかった。この-39kb領域をBRC6細胞にて欠損させると、リポポリ多糖(LPS)刺激によるIL6の発現誘導が顕著に抑制された。この結果は-39kb領域がマスト細胞でのIL6発現誘導を正に制御する領域であることを示す。そこで-39kb領域を欠損する遺伝子改変マウスを、CRISPR-Cas9システムによる遺伝子編集技術を用いて作成した。-39kb領域ホモ欠損マウスでは、腹腔内マスト細胞においてIL6の発現誘導が抑制されることがわかった。一方、マクロファージではIL6の発現誘導は保たれていた。マウス個体にLPS投与した後の血清IL6誘導レベルをELISAにて調べたところ、-39kb領域ホモ欠損マウスでは野生型コントロールと比較して若干の低下が観察された。動物個体内のIL6産生細胞の中でマスト細胞の割合は必ずしも大きくはないと予想される。したがって-39kb領域ホモ欠損マウスで血清IL6誘導レベルの低下が観察されたことは、-39kb領域がマスト細胞以外のIL6産生細胞でも機能している可能性があることを示唆する。特に血管内皮細胞は細胞数も多く、IL6を含むサイトカイン産生量も大きく、GATA2発現レベルも高いため、IL6 -39kb領域の重要性が高い細胞種である可能性があると考えている。