筋ジストロフィーに対する機能強化羊膜間葉系幹細胞を用いた抗炎症療法と評価系の構築

增强功能羊膜间充质干细胞治疗肌营养不良症的抗炎治疗及评估系统

基本信息

批准号：
22K06921
负责人：
笠原優子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06921/
关键词：
間葉系幹細胞筋ジストロフィー炎症制御羊膜細胞治療

项目摘要

最も重篤な筋疾患であるデュシェンヌ型筋ジストロフィー（DMD）は、ジストロフィン欠損に加え慢性炎症により病態進行が促されるため、ジストロフィン発現回復による根本治療が求められる一方で、新たな抗炎症療法の開発が望まれる。従来のステロイド療法は、効果の個人差や長期服用による副作用が懸念されるため、慢性炎症を標的にした新たな治療法として、間葉系幹細胞（MSC）を用いた細胞治療に着目した。MSCは炎症への集積性と制御作用を示すことから、細胞性医薬品として複数の炎症性疾患への適応拡大が進められており、申請者らはMSCを全身反復投与したDMDモデル動物において、病態緩和、炎症の鎮静化、運動機能の維持効果を報告している。しかし、十分な治療効果を得るためには高用量のMSCが必要であり、また、骨格筋組織に取り込まれたMSCによる炎症制御とその生理的意義は十分に解明されていない。さらに、社会実装を目指すにおいてはDMDの重症度や治療効果の指標となる有用なマーカー開発が必須であると考えられる。そこで本課題では、羊膜由来MSC (AMSC)を用いたDMDに対する新規抗炎症療法の基盤技術の検証を目的とする。先ずは、遺伝子導入により機能強化したAMSCを作出、DMD骨格筋細胞への作用機序の検討を行い、さらに、重篤な筋萎縮状態でも測定可能な新たなバイオマーカーを獲得し、治療の指標となる候補物質を検討する計画である。今年度は、AMSCによる骨格筋特異的な組織保護効果や炎症制御能を増強するため、遺伝子導入により分泌因子を増強したAMSCの検討を行った。また、疾患特異的な筋管形成におけるin vitro評価系を構築するため、DMDマウスの骨格筋細胞を採取・培養条件を確立したのち、AMSCとの共培養において液性因子の発現変動による筋細胞への相互作用を検討した。

Duchenne肌肉营养不良（DMD）是最严重的肌肉疾病，是肌营养不良蛋白缺乏症和慢性炎症会刺激该疾病的进展，尽管需要通过恢复肌营养不良蛋白表达来进行基本治疗，但需要新的抗炎治疗。由于人们对长期使用常规类固醇治疗引起的个人作用和副作用的担忧，我们专注于使用间质干细胞（MSC）作为靶向慢性炎症的新疗法。由于MSC对炎症表现出积累和调节作用，因此他们正在扩大其作为细胞药物的多种炎症性疾病的指示，并且申请人报告说，病理缓解，炎症的镇静以及在DMD模型动物中维持运动功能的影响，这些动物经过了MSC的重复给药。然而，需要高剂量的MSC才能获得足够的治疗作用，并且纳入骨骼肌组织中的MSC炎症控制及其生理意义尚未完全了解。此外，开发有用的标记物被认为是DMD严重程度和治疗效率的指标，以实现社会实施。因此，该主题旨在使用羊膜衍生的MSC（AMSC）来验证DMD新型抗炎疗法的基本技术。首先，该公司计划通过基因转移来生成具有增强功能的AMSC，检查对DMD骨骼肌细胞的作用机理，并获得即使在严重的肌肉萎缩状态下也可以测量的新生物标志物，并考虑可以作为治疗指标的候选物质。今年，我们调查了通过基因转移增强分泌因子的AMSC，以增强骨骼肌的组织特异性保护作用和AMSC的炎症控制能力。此外，为了构建一种疾病特异性肌管形成的体外评估系统，收集并培养了DMD小鼠的骨骼肌细胞，并在建立了培养DMD小鼠的骨骼肌细胞的条件后，由于研究了与AMSC共同培养因素的表达，因此与肌细胞相互作用，与肌细胞相互作用。