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膠芽腫微小環境が形成する治療抵抗性の解明

胶质母细胞瘤微环境形成的治疗耐药性的阐明

基本信息

批准号：
22K06990
负责人：
古田拓也
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06990/
关键词：
脳腫瘍悪性腫瘍腫瘍微小環境バイオマーカー膠芽腫

项目摘要

申請者らが着目する炎症マーカーLRG1は最も悪性度の高い原発性脳腫瘍である膠芽腫において様々な発現を示した。LRG1発現の高低に関連する遺伝子発現を次世代シークエンス（RNA-seq）で網羅的に解析したところ、LRG1高発現の腫瘍では血管新生、低発現の腫瘍では幹細胞性に関わる遺伝子発現が抽出された。その中で特に発現量の差が大きく、統計学的に有意な遺伝子について、特異抗体を用いた免疫組織化学およびウエスタンブロットで蛋白発現との正の相関を確認した。膠芽腫細胞株の実験ではLRG1を発現抑制（ノックダウン）した細胞でMatrigel浸潤アッセイを行ったところ腫瘍細胞の浸潤亢進が認められ、外因性LRG1投与がこれを抑制することを見出した。一方でWST-1増殖アッセイではLRG1発現抑制は膠芽腫細胞の増殖には影響を及ぼさないことが示された。以上よりLRG1が膠芽腫細胞の浸潤低下に関与しており、先行研究で示したLRG1高発現が予後良好因子であることが支持された。一方で、浸潤に関与する幹細胞性については未評価であるため、今後、幹細胞株を用いた基礎実験を要する。患者由来新鮮手術検体から初代培養を行い、3種類以上の幹細胞株の樹立を行う。これら複数の膠芽腫幹細胞株に対してLRG1ノックダウンを行い幹細胞性の指標であるsphere形成能の上昇、幹細胞マーカーの発現上昇と外因性LRG1投与による効果相殺を確認する予定である。

The applicant has the highest degree of inflammation and the highest degree of inflammation. LRG1 expression is highly correlated with gene expression in the next generation, RNA-seq analysis, and LRG1 expression is highly correlated with angiogenesis and low correlation with stem cell gene expression. The difference in protein expression was large, statistical analysis was performed, and the positive correlation between protein expression and specific antibody was confirmed by immunohistochemistry. The inhibition of LRG1 expression in tumor cell lines was observed when Matrigel infiltration was detected in tumor cells. WST-1 proliferation was inhibited by LRG-1 expression, which was shown to inhibit the proliferation of glioma cells. The results of the previous study showed that LRG1 expression was significantly lower than that of the control group. A side, infiltration and stem cell nature, not evaluated, future, stem cell strain, the use of basic information Patients from fresh surgery, primary culture, establishment of more than 3 types of stem cell lines. These include an increase in sphere formation capacity, an increase in stem cell development, and confirmation of exogenous LRG1 administration and effect killing.