HIV-1感染におけるDNA脱アミノ化酵素群の真の役割の解明

阐明 DNA 脱氨酶基团在 HIV-1 感染中的真正作用

• 批准号: 22K07103
• 负责人: 池田 輝政
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07103/
• 关键词: APOBEC3; 脱アミノ化依存的HIV抑制; 脱アミノ化非依存的HIV抑制; G-to-A mutation; HIV-1; Vif; THP-1; 宿主因子; 脱アミノ化

ウイルスは宿主細胞の様々なタンパク質を利用することにより自身を複製するが、宿主細胞も様々な防御機構によりウイルス感染を防御しようとする。ウイルス感染抑制に関わる重要なタンパク質の１つがAPOBEC3 (A3) ファミリータンパク質である。A3ファミリータンパク質はヒトでは7つのタンパク質で構成されるが、それぞれの標的や機能が重複しており、A3ファミリータンパク質全体のウイルス感染における役割は完全に明らかにされていない。そこで本研究では、A3ファミリータンパク質の真の生理的役割を明らかにする目的の一端として、本研究室で樹立した全A3遺伝子欠損THP-1細胞を用いて、HIV-1感染におけるA3ファミリータンパク質の真の役割を明らかにすることを目的とした。この目的を達成するために、樹立した全A3遺伝子欠損株において、VSV-Gシュードタイプウイルスを用いた、シングルラウンドのHIV-1感染実験を行った。その結果、樹立した全A3遺伝子欠損株では、Vif欠損HIV-1は、野生株と同等の感染性になることが明らかとなった。また、全A3遺伝子欠損細胞から産生されたVif欠損HIV-1プロウイルス上のG→A変異数を検証したところ、A3タンパク質由来のG→A変異は観察されなかった。また、HIV-1後期逆転写産物の量を測定したところ、全A3遺伝子欠損細胞から産生されたVif欠損HIV-1と野生株の逆転写産物の量はほとんど同じであった。したがってこれらの結果から、THP-1細胞においてHIV-1複製に必要なVifの標的タンパク質は、A3ファミリータンパク質であることが明らかとなった。

ウ イ ル ス は host cell の others 々 な タ ン パ ク を using す る こ と に よ り themselves を replicate す る が, host cell も others 々 な defense agency に よ り ウ イ ル ス infection を defense し よ う と す る. ウ イ ル ス infection inhibition に masato わ る important な タ ン パ ク の 1 つ が APOBEC3 (A3) フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク qualitative で あ る. A3 フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク qualitative は ヒ ト で は 7 つ の タ ン パ ク qualitative で constitute さ れ る が, そ れ ぞ れ や の target function が repeat し て お り, A3 フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク mass all の ウ イ ル ス infection に お け る "は に completely cut Ming ら か に さ れ て い な い. そ こ で this study で は, A3 フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク qualitative の is の physiological "を cut Ming ら か に す る purpose の end と し て, our laboratory で し た all traces of A3 伝 son owe damage of THP 1 cells を using い て, infection of HIV - 1 に お け る A3 フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク cut を Ming ら の is の service quality か に す る こ と を purpose と し た. こ の purpose を reach す る た め に, sets up the し た all traces of A3 伝 son owe damage strain に お い て, types of -g シ ュ ー ド タ イ プ ウ イ ル ス を with い た, シ ン グ ル ラ ウ ン ド の infected with HIV - 1 be 験 を line っ た. そ の results, set up し た all traces of A3 伝 son owe damage strain で は は HIV - 1, 2 Vif is based owe damage, wild strains と equal の infectious に な る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, all traces of A3 伝 son owe damaged cells か ら produce さ れ た 2 Vif is based owe damage of HIV - 1 プ ロ ウ イ ル ス の on G - A - outlier を 検 card し た と こ ろ, A3 タ ン パ ク qualitative origin の G - A - different は 観 examine さ れ な か っ た. ま た late inverse planning, HIV - 1 write product を の quantity determination し た と こ ろ, all traces of A3 伝 son owe damaged cells か ら produce さ れ た 2 Vif is based owe loss と wild strains of HIV - 1 の の inverse planning write product quantity は ほ と ん ど with じ で あ っ た. し た が っ て こ れ ら の results か ら, THP 1 cells に お い て HIV - 1 copy に necessary な 2 Vif is based の mark タ ン パ ク は, A3 フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク qualitative で あ る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

APOBEC3遺伝子欠損細胞を用いた、HIV-1感染におけるAPOBEC3タンパク質の機能解析

使用 APOBEC3 基因缺陷细胞对 HIV-1 感染中的 APOBEC3 蛋白进行功能分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 清水凌、Hesham Nasser、Michael A. Carpenter;Adam Z. Cheng;William L. Brown;Reuben S. Harris、池田輝政
• 通讯作者: Reuben S. Harris、池田輝政

HIV-1 restriction by endogenous APOBEC3 family proteins in the myeloid cell line THP-1

骨髓细胞系 THP-1 中内源性 APOBEC3 家族蛋白对 HIV-1 的限制

• 发表时间: 2022
• 作者: Ikeda T;Nasser H;Shimizu R;Carpenter MA;Cheng AZ;Brown WL;Harris RS
• 通讯作者: Harris RS

APOBEC3遺伝子欠損細胞の作製とHIV-1感染におけるAPOBEC3タンパク質の機能解析

HIV-1感染过程中APOBEC3基因缺陷细胞的产生及APOBEC3蛋白的功能分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 清水凌;池田輝政
• 通讯作者: 池田輝政