プロテオーム熱安定性評価法(TPP)によるがん細胞の酸化ストレス耐性機構の解明
利用蛋白质组热稳定性评价(TPP)阐明癌细胞的氧化应激抵抗机制
基本信息
- 批准号:22K07144
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
がんは微小環境で過剰に産生した活性酸素種 (ROS)にさらされながらも、さまざまな戦略によって酸化ストレス耐性を獲得し、更なる悪性化へと進んでいく。この過程においてROSにより酸化修飾を受けた様々なタンパク質が機能を変化させ、その結果がん特有の酸化ストレス耐性機構が生み出されると考えられているが、その詳細なメカニズムは不明な点が多く存在する。そこでタンパク質の構造や存在状態を包括的に計測するための技術を用いて、ROSによって修飾されたタンパク質の存在状態を指標にがん細胞の酸化ストレス応答を解析するため、申請者らの研究室が所有する各種がん細胞の中からに酸化ストレス応答性を評価した。特にROSとその悪性度が密接に関与している前立腺がんの細胞株における内在性ROSレベルとプロテオーム発現状態をした結果、ROSレベルが高いDU145細胞株において、カタラーゼなどROSを除去する酵素群の発現が低下し、一方でチオール基を還元状態にするチオレドキシンシステムを構成する分子群の発現が亢進しており、タンパク質チオール基のレドックス恒常性の維持に寄与していることが示唆された。また、タンパク質存在状態を解析するためのThermal proteome profiling(TPP)法を実施するために、Peroxiredoxin-1抗体を用いたThermal Shift assayにより予備検討を行った。その結果、Peroxiredoxin-1の熱安定性が亢進する過酸化水素の処理条件を確立した。
The micro-environment produces reactive acid species (ROS), which are resistant to acidification and are more resistant to acidification. This process includes ROS, acidification modification, functional transformation, and results in specific acidification resistance mechanisms. The structure and existence status of the substance include measurement, application, ROS modification, existence status of the substance, indicators, analysis of cellular acidification, and evaluation of the reactivity of all kinds of cellular acidification. In particular, ROS activity is closely related to cell lines in which ROS is present. As a result, ROS activity is high in DU145 cell lines. ROS activity is low in DU145 cell lines. ROS activity is high in DU145 cell lines. ROS The maintenance of constancy in the quality control system is based on the following: The Thermal proteome profiling(TPP) method was used to analyze the presence of Peroxiredoxin-1 antibody in the Thermal Shift assay. As a result, the thermal stability of Peroxiredoxin-1 was enhanced, and the treatment conditions of peracidified water were established.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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