スキルス胃癌の浸潤や腹膜播種に寄与するチロシンリン酸化蛋白質の解明

阐明有助于硬质胃癌侵袭和腹膜播散的酪氨酸磷酸化蛋白

• 批准号: 22K07176
• 负责人: 白木原 琢哉
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07176/
• 关键词: リン酸化タンパク質; スキルス胃がん; FGFR2; 受容体型チロシンキナーゼ; リン酸化

スキルス胃がん細胞株から以前に同定したおよそ250種類のリン酸化タンパク質のリストをもとに、研究計画ではCRISPR-Cas9によるノックアウトスクリーニングを計画している。本年度は、CRISPR-Cas9ノックアウトライブラリの実験系立ち上げと並行して、リン酸化タンパク質リストのうち注目因子の機能解析を行った。LSR(lipolysis-stimulated lipoprotein receptor)はFGFR2シグナルの亢進したスキルス胃がんにおいて強くリン酸化修飾を受けることを見出している。この受容体はコレステロールの輸送体である VLDLを細胞内へ取り込むことから、VLDLを培養液中に添加したところ、濃度依存的にFGFR2型スキルス胃癌の増殖を促進することが明らかとなった。さらに、FGFRのキナーゼ阻害剤を加えたところ、VLDLによる細胞増殖が抑制された。そこで、まずFGFR2によるLSRリン酸化部位を特定することを目指した。LSRにはリン酸化標的として報告されているチロシン残基が16ヶ所存在し、そのうちチロシンキナーゼの標的となりやすい10ヶ所についてフェニルアラニンへの点変異を導入した。いくつかの変異ではリン酸化の程度は野生型と比較して弱くなるものの完全には消失しないことから、LSRは複数箇所がリン酸化標的となることが示唆された。

CRISPR-Cas9 cell lines were previously identified and 250 species of CRISPR-Cas9 cells were identified. This year, CRISPR-Cas9 will conduct functional analysis of all attention factors in parallel with the implementation of CRISPR-Cas9. LSR(lipolysis-stimulated lipoprotein receptor) FGFR2 is activated and acidified. VLDL is an intracellular inhibitor of FGFR2 and a concentration-dependent promoter of gastric cancer. In addition, FGFR and VLDL can inhibit cell proliferation. FGFR2 is the most important factor in the acidification of the liver. LSR is the first to report the presence of 16 residues and the presence of 10 residues. The degree of acidification is different from that of wild type. It is weak and completely disappeared. LSR has multiple acidification targets.

项目成果

The role of TfR1 in the progression of FGFR2 gene-amplified scirrhous gastric cancer

TfR1在FGFR2基因扩增的硬质胃癌进展中的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 白木原琢哉;堺隆一
• 通讯作者: 堺隆一

FGFR2遺伝子増幅型スキルス胃がんの進展に対するTfR1の作用機序について

TfR1对FGFR2基因扩增的硬质胃癌进展的作用机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 白木原琢哉;堺隆一
• 通讯作者: 堺隆一