Research and development of a new tracer for the diagnosis and treatment in the sentinel lymph node of breast cancer

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本研究では乳癌の最大の予後予測因子である腋窩リンパ節転移の有無をより低侵襲に評価し、リンパ節転移を認めた場合でも治療まで可能となる新規トレーサーの開発を目指す。2022年度は乳癌xenograftにおけるSLN転移モデルの確立を目標とした。まずはin vivoイメージングのための遺伝子改変乳癌細胞を作成した。ヒト乳癌細胞に蛍光タンパクや発光タンパク遺伝子の発現ベクターを組み込み乳癌細胞の局在を画像評価できるようにした。本研究ではHER2陽性株、トリプルネガティブかつEGFR陽性である細胞株、ER陽性株を用いた。次に、マウスへのヒト乳癌培養細胞同所移植とSLN転移の評価を行った。 免疫不全マウス(雌)のmammary fad padへ、マトリゲルと混合した上記の乳癌細胞株を100万個から1000万個注入する。腫瘍細胞を移植してから週に1~2回、腫瘍細胞に組み込まれた蛍光タンパクや発光タンパクをIVIS等で観察し、腫瘍細胞の生着およびリンパ節転移を体表から観察した。この際、色素(パテントブルー等)を腫瘍生着部位の周囲皮下・皮内に注射し、転移を認めたリンパ節がSLNであることも確認しつつ実験を進めた。最終的な転移の判断は病理学的に行うのだが、HE染色のみならず免疫染色でも明示できるよう、最適な細胞株を選択しているところである。また、2023年度以降の目標として、乳癌xenograftにおける新規トレーサーを用いたSLN のマッピングと転移評価、及び治療効果判定を掲げており、導入となる新規トレーサーの全身投与による腫瘍集積能力の評価にも取り組めた。ヒト乳癌細胞株を移植したマウスの尾静脈より64Cu-PTCA-Cetuximabを新規トレーサーとして投与し、PETにて腫瘍部位への集積を観察したところ、EGFR陽性株への腫瘍への集積とリンパ節への集積を認めた。