YAP/TAZ同時阻害を標的とした胆道がんの新規治療の創薬研究

针对同时抑制 YAP/TAZ 的胆道癌新疗法的药物发现研究

• 批准号: 22K07280
• 负责人: 杉原 誉明
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07280/
• 关键词: YAP; 胆管癌; 分子標的治療薬; TAZ; Hippo経路

予後不良の難治がんである進行胆道(胆管・胆のう)がんに対する標準化学治療は限られており，効果的な治療法の確立が急務である。今回、進行胆道(胆管・胆のう)がんに対する新規分子標的治療薬の創薬を目的としている。ターゲットは、がん増殖促進因子である転写調節因子Yes-associated protein(YAP)かつ，YAPのパラログ（重複遺伝子）であるTAZ (Transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)である。YAPは，臓器のサイズを決める経路を調節している蛋白質として知られており，多くの癌で発現が過剰になっている事も知られている．これまでYAP阻害剤の開発は行われてきたが、未だ各種癌で有効性の確認された薬剤は無い。YAPを阻害すると、遺伝的に近縁の蛋白質であるTAZがその役割を補う可能性が報告されている．そこで，今回の研究ではYAPのみならず、TAZを両方同時に抑制する新しい治療薬を開発する事を目的とした。①胆道がん細胞株を用いたYAP・TAZ発現抑制効果の検証：胆管がん細胞株（HuCCT-1）を用いて， siRNA を用いてYAP, TAZ単独抑制作用と同時阻害作用における増殖抑制効果を検証し、同時阻害で最も増殖抑制効果が発揮されることを確認した。②化合物スクリーニングアッセイ系の構築：創薬等先端技術支援基盤プラットフォーム（BINDS）事業により提供を受けていたFDA化合物ライブラリーを使用してスクリーニングを実施するためのアッセイ系（eGFP蛍光YAP遺伝子導入細胞株の樹立）を構築した。それにより、1,134化合物をスクリーニングを実施し、YAP 発現抑制が認められた候補化合物を3種類抽出した。③胆管がん細胞株（HuCCT-1）を用いて，抽出したYAP 発現抑制化合物のYAP/TAZ 抑制効果をRT-PCR, ウエスタンブロットを用いて評価し，YAP/TAZ 同時発現抑制効果のある化合物を絞り込み、増殖抑制効果を確認した。

To bad after の refractory が ん で あ る for bile duct, bile duct, gallbladder の う) が ん に す seaborne る は limit standard chemotherapy ら れ て お り, unseen fruit の な therapy establish が because で あ る. This time, the biliary tract (bile duct, gallbladder <s:1> う)がんに is used for the treatment of する new regulation molecular target therapeutic drugs, with the aim of を, と, て, る and る. Youdaoplaceholder0 タ ゲット ゲット ゲット, がん proliferative facilitators である転 writing regulators Yes-associated protein(YAP) である転 ゲット YAP パラログ パラログ (repetitive 伝 motif)である TAZ (Transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)である. YAP は, viscera の サ イ ズ を definitely め る 経 road を adjust し て い る protein と し て know ら れ て お り, more く の carcinoma で 発 が now through turning に な っ て い る matter も know ら れ て い る. <s:1> れまでYAP inhibitors are developed through われて たが たが たが and are not effective in だ various cancers で. <s:1> it is confirmed that された drugs are <s:1> and not れまで. YAP を resistance against す る と, but 伝 に nearly try の protein で あ る TAZ が そ cut を fill う possibility が の service report さ れ て い る. そ こ で, today back to の research で は YAP の み な ら ず, TAZ を struck party at the same time に inhibit す る new し い treatment 薬 を open 発 す る matter を purpose と し た. ① Biliary がん cell line を shows inhibitory effect when used with がん たYAP · TAZ <s:1> 検 evidence: Bile duct が ん cell lines (HuCCT - 1) を い て, siRNA を with い て YAP, TAZ 単 alone at the same time inhibition と resistance against に お け る raised colonization inhibition of unseen fruit を 検 し, the inhibition and resistance against the most も で raised colonization unseen fruit が 発 swing さ れ る こ と を confirm し た. ② Compound ス ス リ ニ ニ ニ グアッセ グアッセ <s:1> matrix construction: Gen 薬 apex techniques such as support base plate プ ラ ッ ト フ ォ ー ム (BINDS) career に よ り provide を by け て い た FDA compound ラ イ ブ ラ リ ー を use し て ス ク リ ー ニ ン グ を be applied す る た め の ア ッ セ イ system (eGFP 蛍 YAP but 伝 seed import cell lines の set) を build し た. そ れ に よ り, 1134 compounds を ス ク リ ー ニ ン グ を be し, YAP 発 inhibit が now recognize め ら れ を た alternate compounds 3 kinds spare し た. (3) bile duct が ん cell lines (HuCCT - 1) を い て, drew し た YAP 発 now inhibition compounds の YAP/TAZ inhibition of unseen fruit を rt-pcr, ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト を with い て review 価 し, YAP/TAZ 発 now at the same time suppress unseen fruit の あ る compound を ground り 込 み, inhibition of unseen rights colonization fruit を confirm し た.